GB/T 31270.19-2014 化学农药环境安全评价试验准则 第19部分：非靶标植物影响试验

　　ICS 65. 100 B 13

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 31270. 19—2014

　　化学农药环境安全评价试验准则

　　第 19部分 :非靶标植物影响试验

　　Testguidelineson environmentalsafety assessmentforchemicalpesticides—

　　Part19:Effectson non-targetplants

　　2014-10-10发布 2015-03-11 实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　发

　　布

　　GB/T 31270. 19—2014

　　前 言

　　GB/T 31270《化学农药环境安全评价试验准则》分为 21个部分 :

　　— 第 1部分 :土壤降解试验 ;

　　— 第 2部分 :水解试验 ;

　　— 第 3部分 :光解试验 ;

　　— 第 4部分 :土壤吸附/解吸试验 ;

　　— 第 5部分 :土壤淋溶试验 ;

　　— 第 6部分 :挥发性试验 ;

　　— 第 7部分 :生物富集试验 ;

　　— 第 8部分 :水-沉积物系统降解试验 ;

　　— 第 9部分 :鸟类急性毒性试验 ;

　　— 第 10部分:蜜蜂急性毒性试验 ;

　　— 第 11部分 :家蚕急性毒性试验 ;

　　— 第 12部分 :鱼类急性毒性试验 ;

　　— 第 13部分 :溞类急性活动抑制试验 ;

　　— 第 14部分 :藻类生长抑制试验 ;

　　— 第 15部分 :蚯蚓急性毒性试验 ;

　　— 第 16部分 :土壤微生物毒性试验 ;

　　— 第 17部分 :天敌赤眼蜂急性毒性试验 ;

　　— 第 18部分 :天敌两栖类急性毒性试验 ;

　　— 第 19部分 :非靶标植物影响试验 ;

　　— 第 20部分 :家畜短期饲喂毒性试验 ;

　　— 第 21部分 :大型甲壳类生物毒性试验 。

　　本部分是 GB/T 31270的第 19部分 。

　　本部分按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。

　　本部分由中华人民共和国农业部提出并归 口 。

　　本部分负责起草单位 :农业部农药检定所 、环保部南京环境科学研究所 。

　　本部分主要起草人 :单正军 、李义方 、卜元卿 、续卫利 、韩先国 、张兰 、李岗 。

　　化学农药环境安全评价试验准则

　　第 19部分 :非靶标植物影响试验

　　1 范围

　　GB/T 31270的本部分规定了化学农药对非靶标植物影响试验的材料 、条件 、操作 、质量控制 、数据处理 、试验报告等的基本要求 。

　　本部分适用于为化学农药登记而进行的非靶标植物影响试验 ,其他类型的农药可参照使用 。

　　本部分不适用于易挥发和难溶解的化学农药 。

　　2 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件 。

　　2. 1

　　非靶标植物 non-targetplants

　　农药施用区域以外的植物 。

　　2.2

　　出苗 emergence

　　种子播种后 ,植物的胚芽鞘或子叶露出地面 。

　　2.3

　　株高 length ofplant

　　从根颈部到顶芽的垂直高度 。

　　2.4

　　生物量 biomass

　　本部分中指试验结束后 ,收获受试植物地上部分 ,在 60 ℃条件下烘干至恒重后求得的平均干重 。 2.5

　　半效应浓度 median effectconcentration

　　在非靶标植物影 响 试 验 中 , 试 验 组 与 对 照 相 比 较 产 生 50%不 良 反 应 时 的 供 试 物 浓 度 , 用 EC50表示 。

　　注 : 单位为 mg a.i./kg干土 。

　　2.6

　　供试物 testsubstance

　　试验中需要测试的物质 。

　　2.7

　　化学农药 chemicalpesticide

　　利用化学物质人工合成的农药 。其中有些以天然产品中的活性物质为母体 ,进行仿制 、结构改造 ,创新而成 ,为仿生合成农药 。

　　同义词 :有机合成农药 synthetic organic pesticide。

　　[NY/T 1667. 1—2008,定义 2. 3. 1]

　　GB/T 31270. 19—2014

　　2. 8

　　原药 technicalmaterial

　　在制造过程中得到的有效成分及杂质组成的最终产品,不能含有可见的外来物质和任何添加物 ,必要时可加入少量的稳定剂 。

　　[NY/T 1667. 2—2008,定义 2. 5. 1] 2.9

　　制剂 formulation product

　　由农药原药(或母药)和助剂制成使用状态稳定的产品 。

　　[NY/T 1667. 2—2008,定义 2. 4]

　　2. 10

　　有效成分 active ingredient;a. i.

　　农药产品中具有生物活性的特定化学结构成分 。

　　[NY/T 1667. 2—2008,定义 3. 1]

　　3 试验概述

　　土壤用定量的供试物处理后播入种子 ,在对照组出苗率达到 50%后的第 14天观察记录出苗率 、生物量 、株高及其他不良反应如畸形 、发育迟缓等 。计算最敏感指标的 25%效应浓度(EC25 ) 、半效应浓度(EC50)及其 95%置信限 。

　　4 试验方法

　　4. 1 材料和条件

　　4. 1. 1 供试物

　　试验应至少使用 3种不同科植物 ,供试验植物选择原则为 :

　　— 当地直接受影响的具有重要经济 、生态价值的植物 ;

　　— 种子容易获得 , 出芽率均匀 ,长势一致 ;

　　— 在试验条件下易于生长 ;

　　— 满足试验质量要求 。

　　推荐供试植物参见附录 A。

　　4. 1.2 供试物

　　农药制剂 、原药或纯品 。难溶于水的可用少量挥发性有机溶剂助溶 。

　　4. 1.3 供试土壤

　　土壤有机质含量不高于 3% ,风干后过 2 mm 筛 ,土壤的采集贮存参见附录 B。

　　4. 1.4 主要仪器设备

　　主要仪器设备如下 :

　　— 人工气候室 ;

　　— 盆钵 。

　　4. 1.5 试验条件

　　温度 23 ℃ ~ 27 ℃ (光 照) 、20 ℃ ~ 24 ℃ (黑 暗) , 湿 度 55% ~ 85% , 光 暗 比 16 ∶ 8, 光 照 强 度15 000 lx~ 20 000 lx。

　　4.2 试验操作

　　4.2. 1 预试验

　　按正式试验的条件 , 以较大间距设置 4 个 ~ 5 个浓度组 。 预试验的最高浓度根据受试物的田间最大施用量计算 ,通过预试验得出供试农药对受试植物的最高效应与最低效应浓度 。

　　4.2.2 正式试验

　　在预试验确定的浓度范围内按几何级差设置 5个 ~ 7个浓度组 ,每个处理设 3 个重复 ,并设一组空白对照 ,如使用助溶剂需另设一组溶剂对照 。选用合适直径的盆钵 ,装入厚度不低于 10 cm 的土壤 , 土壤与供试物充分拌匀后 ,播入 10粒种子 ,种子密度根据其大小达到 3 粒/100 cm2 ~ 10粒/100 cm2 。将盆钵置于人工气候室中 ,试验过程中土壤保持湿润 ,从底部吸湿浇水 。对照组出苗率达到 50%后的第14天观察记录出苗率 、生物量 、株高及其他不良反应 。计算最敏感指标的 EC25、EC50和 95%置信限 。

　　4.2.3 限度试验

　　田间最大施用 浓 度 的 3 倍 作 为 上 限 浓 度 , 若 该 浓 度 小 于 1. 0 mg a. i./kg干 土 , 则 上 限 浓 度 为1. 0 mg a. i./kg干土 。上限浓度未对非靶标植物产生影响 ,可判定供试物对非靶标植物为低毒 ,无需继续进行试验 。

　　4.3 数据处理

　　4.3. 1 统计分析方法的选择

　　可采用直线内插法或概率单位图解法计算第 14天对受试植物的 EC25 和 EC50 ,也可采用数据统计软件进行分析和计算 。

　　4.3.2 直线内插法

　　采用线性刻度坐标 ,绘制试验物质浓度对应的产生不良影响百分率曲线 ,求出 EC25和 EC50 。

　　4.3.3 概率单位图解法

　　用半对数纸 , 以浓度对数为横坐标 、产生不良影响百分率对应的概率单位为纵坐标绘图 。将各实测值在图上用目测法画一条相关直线 ,从直线中读出产生不良影响 25%和 50%的浓度对数 ,估算出 EC25和 EC50值 。

　　4.4 质量控制

　　质量控制条件包括 :

　　— 对照组种子出苗率 70%以上 ,成活率 90%以上 ;

　　— 幼苗生长正常 ,无萎黄 、坏死 、萎蔫等症状 。

　　5 试验报告

　　试验报告至少应包括下列内容 :

　　— 供试物的信息 ,包括农药的通用名 、化学名称 、结构式 、CAS号 、基本理化性质 、纯度 、来源 、主要使用情况等 ;

　　— 供试植物的学名,品种或品系 、来源 ;

　　— 供试土壤的 pH、有机质含量 、阳离子代换量等 ;

　　— 主要仪器设备 ;

　　— 试验条件 ,包括温度 、湿度 、光照度 ;

　　— 观察到的毒性效应 ,包括各处理浓度及处理的出苗率 、生物量及其他不良影响 ;

　　— 对非靶植物的毒性等级划分参见附录 C。

　　附 录 A (资料性附录)推荐供试植物

　　推荐以下供试植物 ,见表 A. 1。

　　表 A. 1 推荐供试植物

　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　试验土壤的采集与贮存

　　B. 1 土壤的采集

　　选择的土壤采集点应能长期使用 ,需了解土壤采集点的详细背景信息 ,包括 :地点 ,植被覆盖情况 ,农药 、肥料等的施用情况 。要求采样地点在采样前至少一年内未施用过农药 ,至少 6个月内未施用过有机肥 。如果在必需的情况下施用了无机肥 ,则应在施肥至少 3个月后才能采集土壤 。

　　应避免在长时间干旱或水涝期间(超过 30 d) 采样 , 或在此期后立即采样 。 在耕地 ,采样的深度为0 cm~ 20 cm; 在长期没有耕作(至少一个生长季节)的草场牧地或其他类型的土壤中采样时 ,最大深度可略超过 20 cm。

　　运输土壤样品时应使用合适的容器 ,并保持适宜的温度以确保土壤的性质不会发生显著的改变 。

　　B.2 土壤的贮存

　　土壤风干后应置于 4 ℃ ±2 ℃黑暗处保存 ,最长可保存 3个月 。土壤在储存期间应保持有氧条件 。如果采样地区每年至少有 3个月冰冻期 ,则采集的土壤可在 -22 ℃ ~-18 ℃条件下储存 6个月 。

　　附 录 C

　　(资料性附录)

　　农药对非靶标植物毒性评价标准

　　按农药对非靶标植 物 生 长 抑 制 半 数 效 应 浓 度 EC50 值 , 将 农 药 对 非 靶 标 植 物 毒 性 划 分 为 四 级(见表 C. 1) 。

　　表 C. 1 农药对非靶标植物的毒性等级划分

　　参 考 文 献

　　[1] NY/T 1667. 1—2008 农药登记管理术语 第 1 部分 :基本术语

　　[2] NY/T 1667. 2—2008 农药登记管理术语 第 2 部分 :产品化学

　　[3] OECD(2006) . Guidelines 208: Terrestrial Plant Test: Seedling Emergence and Seedling Growth Test, OECD Guidelines for the Testing ofChemicals.

　　[4] USEPA(2012) . Seedling Emergence and Seedling Growth(OCSPP 850. 4100) , Ecological effects testguidelines.

　　[5] NY/T 1155. 6—2006 农药室内生物测定试验准则 除草剂 第 6部分 :对作物的安全性试验 土壤喷雾法

　　[6] 蔡道基 . 农药环境毒理学研究 . 北京 : 中国环境科学出版社 ,1999.

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