GB/T 31270.2-2014 化学农药环境安全评价试验准则 第2部分：水解试验

　　ICS 65. 100 B 13

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 31270.2—2014

　　化学农药环境安全评价试验准则

　　第 2 部分 :水解试验

　　Testguidelineson environmentalsafety assessmentforchemical

　　pesticides—Part2: Hydrolysis

　　2014-10-10发布 2015-03-11 实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　发

　　布

　　GB/T 31270.2—2014

　　前 言

　　GB/T 31270《化学农药环境安全评价试验准则》分为 21个部分 :

　　— 第 1部分 :土壤降解试验 ;

　　— 第 2部分 :水解试验 ;

　　— 第 3部分 :光解试验 ;

　　— 第 4部分 :土壤吸附/解吸试验 ;

　　— 第 5部分 :土壤淋溶试验 ;

　　— 第 6部分 :挥发性试验 ;

　　— 第 7部分 :生物富集试验 ;

　　— 第 8部分 :水-沉积物系统降解试验 ;

　　— 第 9部分 :鸟类急性毒性试验 ;

　　— 第 10部分:蜜蜂急性毒性试验 ;

　　— 第 11部分 :家蚕急性毒性试验 ;

　　— 第 12部分 :鱼类急性毒性试验 ;

　　— 第 13部分 :溞类急性活动抑制试验 ;

　　— 第 14部分 :藻类生长抑制试验 ;

　　— 第 15部分 :蚯蚓急性毒性试验 ;

　　— 第 16部分 :土壤微生物毒性试验 ;

　　— 第 17部分 :天敌赤眼蜂急性毒性试验 ;

　　— 第 18部分 :天敌两栖类急性毒性试验 ;

　　— 第 19部分 :非靶标植物影响试验 ;

　　— 第 20部分 :家畜短期饲喂毒性试验 ;

　　— 第 21部分 :大型甲壳类生物毒性试验 。

　　本部分是 GB/T 31270的第 2部分 。

　　本部分按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。

　　本部分由中华人民共和国农业部提出并归 口 。

　　本部分负责起草单位 :农业部农药检定所 、环保部南京环境科学研究所 。

　　本部分主要起草人 :蔡磊明 、朴秀英 、吴珉 、单正军 、王娜 、刘新刚 、桂文君 、平立凤 。

　　化学农药环境安全评价试验准则

　　第 2 部分 :水解试验

　　1 范围

　　GB/T 31270的本部分规定了化学农药水解试验的材料 、条件 、操作 、质量控制 、数据处理 、试验报告等的基本要求 。

　　本部分适用于为化学农药登记而进行的水解试验 ,其他类型的农药可参照使用 。

　　本部分不适用于高挥发性农药的水解特性测定 。

　　2 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件 。

　　2. 1

　　水解作用 hydrolysis

　　农药在水中进行的化学分解现象 。 常用水解半衰期(t0. 5 )表示 。

　　[NY/T 1667. 5—2008,定义 3. 4. 2. 2] 2.2

　　水解半衰期 half-lifetimeofhydrolysis

　　供试物浓度经水解减少至初始浓度的 1/2时所需的时间 ,用 t0. 5表示 。

　　2.3

　　供试物 testsubstance

　　试验中需要测试的物质 。

　　2.4

　　化学农药 chemicalpesticide

　　利用化学物质人工合成的农药 。其中有些以天然产品中的活性物质为母体 ,进行仿制 、结构改造 ,创新而成 ,为仿生合成农药 。

　　同义词 :有机合成农药 synthetic organic pesticide。

　　[NY/T 1667. 1—2008,定义 2. 3. 1] 2.5

　　原药 technicalmaterial

　　在制造过程中得到的有效成分及杂质组成的最终产品,不能含有可见的外来物质和任何添加物 ,必要时可加入少量的稳定剂 。

　　[NY/T 1667. 2—2008,定义 2. 5. 1] 2.6

　　有效成分 active ingredient;a. i.

　　农药产品中具有生物活性的特定化学结构成分 。

　　[NY/T 1667. 2—2008,定义 3. 1]

　　GB/T 31270.2—2014

　　3 试验概述

　　水解作用试验是在不同温度条件 、不同 pH 的缓冲液中无菌培养供试物 ,定期取样 ,分析水中供试物含量 , 以得到供试物的水解曲线 。

　　4 试验方法

　　4. 1 材料和条件

　　4. 1. 1 供试物

　　供试物使用农药纯品 、原药或制剂 。

　　4. 1.2 缓冲溶液

　　使用试剂级化学品和蒸馏水制备缓冲溶液,pH 值为 4、7 和 9,缓冲溶液的配制参见附录 A。缓冲溶液及试验器皿均应高温高压灭菌 ,灭菌后的溶液应重新校正 pH 。整个试验过程中应避光 、避免氧化作用 。

　　4. 1.3 主要仪器设备

　　主要仪器设备如下 :

　　— 气相色谱仪 ;

　　— 液相色谱仪 ;

　　— 培养箱 ;

　　—pH计 ;

　　— 灭菌设备等 。

　　4.2 试验操作

　　4.2. 1 预试验

　　分别用 pH 4、7 和 9 的缓冲溶液配制供试物水溶液 。若供试物的水中饱和溶解度 >0. 02 mol/L,则初始浓度 ≤0. 01 mol/L;若供试物的水中饱和溶解度 ≤0. 02 mol/L,则初始浓度 ≤50% 饱和溶解度 。难溶于水的供试物加助溶剂(如乙醇 、乙腈和丙酮等)不超过 1%(体积分数) 。供试物水溶液的配制 、分装应在无菌条件下进行 。配制好的供试物水溶液经 0. 22μm 滤膜过滤后置于具塞容器中 ,在(50±1) ℃恒温条件下培养 5 d测定水样中供试物含量 。如水解率<10% ,可认为供试物具有化学稳定性 (25 ℃时 , t0. 5 >365d) ,不需继续进行正式试验 ;如水解率 ≥10% ,则需进行正式试验 。

　　4.2.2 正式试验

　　根据预试验结果 ,配制两组相同 pH值的供试物水溶液若干瓶 ,分别置于(25±1) ℃ 、(50±1) ℃恒温条件下培养 。从开始培养起 ,定期取样至少 7次 ,每次两个平行样 ,测定水样中供试物含量 。

　　试验进行至水解率达 90%以上时终止 ,但试验最长进行至第 120 d。

　　4.3 数据处理

　　降解规律遵循一级动力学方程的农药 ,按式(1)与式(2)求得水解半衰期 t0. 5 ; 降解规律不遵循一级

　　动力学方程的农药无需计算水解半衰期 。

　　Ct =C0e-kt ……………………( 1 )

　　式中 :

　　Ct —t时的供试物质量浓度 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　C0 — 供试物的起始质量浓度 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　k — 水解速率常数 ;

　　t — 反应时间 ,单位为小时(h) 或天(d) ;

　　t ……………………( 2 )

　　式中 :

　　t0. 5— 水解半衰期 ,单位为小时(h) 或天(d) ;

　　k — 水解速率常数 。

　　4.4 质量控制

　　质量控制条件包括 :

　　— 水中农药残留量测定方法回收率为 70% ~ 110% ,最低检测浓度应低于初始浓度的 1% ,添加回收浓度应至少包括试验初始浓度和 10%试验初始浓度 ,每个浓度重复 5 次 ;

　　— 降解动态曲线至少 7个点 ,其中 5个点的浓度值为实测初始浓度的 20% ~80% 。

　　5 试验报告

　　试验报告至少应包括下列内容 :

　　— 供试物的信息 , 包括供试农药的通用名 、化学名称 、结构式 、CAS号 、纯度 、基 本 理 化 性 质 、来源等 ;

　　— 缓冲溶液的信息 ,包括 pH 4、7 和 9缓冲溶液的制备(若使用附录 A 以外的缓冲溶液应在报告中注明配方来源) ;

　　— 主要仪器设备 ;

　　— 试验条件 ,包括供试物水溶液配制方法 、初始浓度 、灭菌条件、pH、温度和取样时间等 ;

　　— 水中农药残留量分析方法描述 ,包括样品前处理 、测定条件 、线性范围 、添加回收率 、相对标准偏差 、方法定量限和典型谱图等 ;

　　— 试验结果 ,包括测定结果 、水解曲线 、水解半衰期 、相关系数和实测典型谱图等 ;

　　— 水解特性等级划分参见附录 B。

　　附 录 A

　　(资料性附录)缓冲溶液的配制

　　缓冲溶液的配制参见表 A. 1。

　　表 A. 1 缓冲溶液的配制

　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　农药水解特性等级划分

　　按农药水解半衰期 t0. 5 ,将农药水解特性分为四级 ,见表 B. 1。

　　表 B. 1 农药水解特性等级划分(25℃ )

　　参 考 文 献

　　[1] NY/T 1667. 1—2008 农药登记管理术语 第 1 部分 :基本术语

　　[2] NY/T 1667. 2—2008 农药登记管理术语 第 2 部分 :产品化学

　　[3] FAO (1989) . Guidelines on environmental criteria for the registration of pesticides.

　　[4] OECD (2004) . Guideline 111: Hydrolysis as a function of pH , OECD Guidelines for the testing of chemicals.

　　[5] USEPA (2008) . Hydrolysis(OPPTS835. 4100) . Fate, Transpotand Transformation Test Guidelines.

　　[6] NY/T 1860. 9—2010农药理化性质测定试验导则 第 9部分 :水解

　　[7] 蔡道基 . 农药环境毒理学研究 . 北京 : 中国环境科学出版社 . 1999.