GB/T 22964-2008 河豚鱼、鳗鱼中林可霉素、竹桃霉素、红霉素、替米考星、泰乐菌素、螺旋霉素、吉他霉素、交沙霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

　　ICS 67 . 050 X 04

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 22964—2008

　　河豚鱼 、鳗鱼中林可霉素 、竹桃霉素 、

　　红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、

　　吉他霉素 、交沙霉素残留量的测定

　　液相色谱-串联质谱法

　　Determination oflincomycin，oleandomycin，erythromycin，tilmicosin，

　　tylosin，spiramycin，kitasamycin andjosamycin

　　residuesin fugu and eel—

　　LC-MS-MS method

　　2008-12-31 发布 2009-05-01 实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 22964—2008

　　前 言

　　本标准的附录 A 、附录 B 为资料性附录 。

　　本标准由国家质量监督检验检疫总局提出并归 口 。

　　本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局 。

　　本标准主要起草人：王飞 、王海洋 、曹彦忠 、贾光群 、张进杰 、石玉秋 、庞国芳 。

　　Ⅰ

　　GB/T 22964—2008

　　河豚鱼 、鳗鱼中林可霉素 、竹桃霉素 、

　　红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、

　　吉他霉素 、交沙霉素残留量的测定

　　液相色谱-串联质谱法

　　1 范围

　　本标准规定了河豚鱼和鳗鱼中林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法 。

　　本标准适用于河豚鱼和鳗鱼中林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素残留量的测定 。

　　本标准的方法检出限：河豚鱼中的林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素均为 2 . 0 μg/kg 。鳗鱼中的林可霉素 、红霉素 、泰乐菌素 、吉他霉素均为 2 . 0 μg/kg ,螺旋霉素 、竹桃霉素 、交沙霉素 、替米考星均为 5 . 0 μg/kg 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是注 日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本 。凡是不注 日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 。

　　GB/T 6379 . 1 测 量 方 法 与结 果 的 准 确度( 正 确度 与 精 密 度 ) 第 1 部 分：总 则 与 定 义(GB/T 6379 . 1—2004 , ISO 5725-1:1994 , IDT)

　　GB/T 6379 . 2 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第 2 部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法( GB/T 6379 . 2—2004 , ISO 5725-2:1994 , IDT)

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682—2008 , ISO 3696:1987 , MOD)

　　3 原理

　　河豚鱼和鳗鱼中林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素的残留用 Tris 缓冲溶液提取后，经 Oasis HLB 固相萃取柱1) 净化，甲醇洗脱，洗脱液浓缩定容后，液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量 。

　　4 试剂和材料

　　除另有说明外，所用试剂均为分析纯 。

　　4 . 1 水：GB/T 6682 , 一级 。

　　4 . 2 甲醇：色谱纯 。

　　4 . 3 乙酸铵 。

　　4 . 4 乙腈：色谱纯 。

　　4 . 5 盐酸 。

　　4 . 6 三羟甲基氨基甲烷( tris) : C4 H 11 NO3 。

　　1) Oasis HLB 固相萃取柱是 waters 公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可 。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品 。

　　1

　　GB/T 22964—2008

　　4 . 7 氯化钙：CaCl2 ·2H2 O 。

　　4 . 8 甲醇溶液：2+3 。400 mL 甲醇(4 . 2)与 600 mL水混合 。

　　4 . 9 0 . 01 mol/L 乙酸铵溶液：0 . 77 g 乙酸铵(4 . 3)溶解于水中，定容于 1 000 mL容量瓶中 。

　　4 . 10 定容液：0 . 01 mol/L 乙酸铵溶液(4 . 9) +乙腈(4 . 4)(17+3) 。

　　4 . 1 1 tris 溶液：称取 12 . 0 g 三羟甲基氨基甲烷(4 . 6) 、7 . 35 g 氯化钙(4 . 7)溶解于 1000 mL 水中，用盐酸(4 . 5)调节 pH 值为 9 。

　　4 . 12 标准物质：林可霉素(CAS:7179-49-9) 、竹桃霉素(CAS:7060-74-4) 、红霉素(CAS:59319-72-1) 、替米考 星 (CAS: 108050-54-0) 、泰 乐 菌 素 (CAS: 74610-55-2) 、螺 旋 霉 素 (CAS: 8025-81-8) 、吉 他 霉 素 (CAS:1392-21-8) 、交沙霉素(CAS:16846-24-5)和内标物质罗红霉素(CAS:80214-83-1) ,纯度 ≥95% 。

　　4 . 13 标准储备溶液 Ⅰ : 1 . 0 mg/mL 。依次准确称取每种标准物质(4 . 12)适量，分别放入相应的 10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，混匀 。4 ℃保存 。

　　4 . 14 标准储备溶液 Ⅱ : 10 . 0 μg/mL 。依次吸取 0 . 1 mL 各标准储备溶液 Ⅰ (4 . 13) ,分别放入相应的10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度 。4 ℃保存 。

　　4 . 15 标准工作溶液：2 . 0 μg/mL 。 依 次 吸 取 2 . 0 mL 混 合 标 准 储 备 溶 液 Ⅱ (4 . 14) ,分 别 放 入 相 应 的10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度 。

　　4 . 16 内标储备溶液：1 . 0 mg/mL 。准确称取 10 . 0 mg 罗红霉素(4 . 12) 于 10 mL 容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，混匀 。4 ℃保存 。

　　4 . 17 中间浓度内标溶液：10 . 0 μg/mL 。 吸取 0 . 1 mL 内标储备溶液(4 . 16) 于 10 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度 。4 ℃保存 。

　　4 . 18 内标工作溶液：1 . 0 μg/mL 。 吸取 1 . 0 mL 中间浓度内标标准溶液(4 . 17)于 10 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度 。

　　4 . 19 基质标准混合工作溶液：

　　测定河豚鱼用基质标准混合工作溶液：分别吸取 1 . 0 μL、2 . 0 μL、5 . 0 μL、25 . 0 μL 标准工作溶液(4 . 15) , 依次加入相应的试剂瓶中，再分别加入 20 . 0 μL 内标工作溶液(4 . 18) ,用样品空白提取液定容至 1 . 0 mL 。配成林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素分别为 2 . 0 ng/mL 、4 . 0 ng/mL、10 . 0 ng/mL、50 . 0 ng/mL 的四 个 浓 度 水 平 的 系 列 基 质 标 准 混 合 工 作溶液 。

　　测定鳗鱼用基质标准混合工作溶液：分别吸取 林 可 霉 素 、红 霉 素 、泰 乐 菌 素 、吉 他 霉 素 各 1 . 0 μL、

　　2 . 0 μL、5 . 0 μL、25 . 0 μL标准工作溶液(4 . 15) 和螺旋霉素 、竹桃霉素 、交沙霉素 、替米考星各 2 . 5 μL、 5 . 0 μL、10 . 0 μL、25 . 0 μL标准工作溶液(4 . 15) , 依次加入相应的试剂瓶中，再分别加入 20 . 0 μL 内标工作溶液(4 . 18) ,用样品空白提取液定容至 1 . 0 mL 。配成林可霉素 、红霉素 、泰乐菌素 、吉他霉素分别为 2 . 0 ng/mL、4 . 0 ng/mL、10 . 0 ng/mL、50 . 0 ng/mL 和螺旋霉素 、竹桃霉素 、交沙霉素 、替米考星分别为 5 . 0 ng/mL、10 . 0 ng/mL、20 . 0 ng/mL、50 . 0 ng/mL 的 四 个 浓 度 水 平 的 系 列 基 质 标 准 混 合 工 作溶液 。

　　4 . 20 Oasis HLB 固相萃取柱：500 mg , 6 mL , 或相当者 。使用前，先后用 10 mL 甲醇和 10 mL 水活化，在抽真空前的各步骤中，都保持柱体湿润 。

　　4 . 2 1 滤膜：0 . 2 μm 。

　　5 仪器

　　5 . 1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源 。

　　5 . 2 天平：感量 0 . 01 g, 0 . 000 1 g 。

　　5 . 3 固相萃取装置 。

　　5 . 4 氮气浓缩仪 。

　　5 . 5 具塞聚丙烯离心管：50 mL 。

　　2

　　GB/T 22964—2008

　　5 . 6 离心机：20 000 g 离心力(或相当于 12 000 r/min) 。

　　5 . 7 超声波清洗仪 。

　　5 . 8 pH 计 。

　　5 . 9 振荡器 。

　　6 试样制备与保存

　　6 . 1 试样的制备

　　从全部样品中取出有代表性样品约 1 kg,充分搅碎，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内 。 密封后作为试样，标明 标 记 。 在 抽 样 和 制 样 的 操 作 过 程 中，应 防 止 样 品 受 到 污 染 或 发 生 残 留 物 含 量 的变化 。

　　6 . 2 试样的保存

　　将试样于- 18 ℃保存 。

　　7 测定步骤

　　7 . 1 提取

　　称取 5 g试样，精确至 0 . 01 g,置于 50 mL 离心管(5 . 5) 中，加入 20 . 0 μL 内标工作溶液(4 . 18) 和

　　10 . 0 mL tris 溶液(4 . 11) ,于振荡器上剧烈振荡 10 min 。 以 12 000 r/min转速离心 10 min,取上清液以小于 1 . 0 mL/min 的流速通过 Oasis HLB 固相萃取柱(4 . 20) 。再加入 10 . 0 mL tris 溶液(4 . 11) ,于振荡器上剧烈振荡 10 min 。 以 12 000 r/min 转 速 离 心 10 min,取 上 清 液 以 小 于 1 mL/min 的 流 速 通 过Oasis HLB 固相萃取柱 。

　　7 . 2 净化

　　待样液全部流出后，先后用 10 mL水和 10 mL 甲醇溶液(4 . 8) 洗柱，弃去全部流出液，将固相萃取柱用真空泵抽干 1 h 。再用 10 mL 甲醇(4 . 2) 洗脱于 15 mL 氮吹管中，用氮气浓缩仪于 50℃水浴中吹至近干，准确加入 1 . 0 mL定容液(4 . 10) ,于超声波仪中超声波助溶残渣 。 用阴性样品，按上述步骤制备空白样品提取液 。过 0 . 2 μm 滤膜(4 . 21)后，供液相色谱-串联质谱仪测定 。

　　按上述操作步骤，制备用于配制系列基质标准工作溶液的空白样品提取液 。

　　7 . 3 测定条件

　　7 . 3 . 1 液相色谱参考条件

　　a) 色谱柱：Atlantis C18 ,内径 3 μm , 150 mm×2 . 1 mm(内径)或相当者;

　　b) 流动相 A：乙腈;

　　c) 流动相 B: 0 . 1%甲酸水溶液;

　　d) 流动相 C：甲醇;

　　e) 梯度洗脱条件：见表 1 ;

　　f) 流速：0 . 2 mL/min ;

　　g) 柱温：30 ℃ ;

　　h) 进样量：20 μL 。

　　表 1 梯度洗脱条件

　　时间/min

　　A/%

　　B/%

　　C/%

　　0 . 00

　　90 . 0

　　5 . 0

　　5 . 0

　　5 . 00

　　5 . 0

　　90 . 0

　　5 . 0

　　9 . 00

　　5 . 0

　　90 . 0

　　5 . 0

　　9 . 10

　　90 . 0

　　5 . 0

　　5 . 0

　　17 . 0

　　90 . 0

　　5 . 0

　　5 . 0

　　3

　　GB/T 22964—2008

　　7 . 3 . 2 质谱条件参考条件

　　a) 离子源：电喷雾离子源;

　　b) 扫描方式：正离子扫描;

　　c) 检测方式：多反应监测;

　　d) 电喷雾电压：5 500 V ;

　　e) 雾化气压力：0 . 24 MPa ;

　　f) 辅助气流速：0 . 4 L/min ;

　　g) 离子源温度：550 ℃ ;

　　h) 碰撞室出 口 电压：2 . 0 V ;

　　i) 定性离子对 、定量离子对 、碰撞气能量和去簇电压：见表 2 。

　　表 2 林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素定性离子对 、定量离子对 、碰撞气能量和去簇电压

　　化合物中文名称

　　化合物英文名称

　　定性离子对(m/≈)

　　定量离子对(m/≈)

　　碰撞气能量/V

　　去簇电压/V

　　林可霉素

　　lincomycin

　　407/126

　　407/359

　　407/126

　　37

　　24

　　50

　　50

　　竹桃霉素

　　oleandomycin

　　688/158

　　688/544

　　688/158

　　70

　　42

　　30

　　30

　　红霉素

　　erythromycin

　　734/158

　　734/576

　　734/158

　　42

　　28

　　50

　　50

　　替米考星

　　tilmicosin

　　869/174

　　869/132

　　869/174

　　62

　　70

　　90

　　90

　　泰乐菌素

　　tylosin

　　916/174

　　916/145

　　916/174

　　54

　　55

　　80

　　80

　　螺旋霉素

　　spiramycin

　　843/142

　　843/174

　　843/142

　　48

　　50

　　60

　　60

　　吉他霉素

　　kitasamycin

　　772/215

　　772/109

　　772/215

　　43

　　42

　　70

　　70

　　交沙霉素

　　josamycin

　　828/174

　　828/109

　　828/174

　　45

　　45

　　80

　　80

　　7 . 4 液相色谱-串联质谱测定

　　7 . 4 . 1 定性测定

　　被测组分选择 1 个母离子，2 个以上子离子，在相同的试验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差±2 . 5%之内;且待测样品溶液中，被测物中各定性离子相对丰度与浓度接近的基质标准工作溶液中被测物的各定性离子相对丰度的比值 K，偏差不超过表 3 规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物 。

　　表 3 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 以 %表示

　　相对离子丰度 K

　　K>50

　　20

　　10

　　K≤10

　　允许最大偏差

　　± 20

　　± 25

　　± 30

　　± 50

　　7 . 4 . 2 定量测定

　　在仪器的最佳工作条件下，用基质标准混合工作溶液(4 . 19)分别进样，以各标准溶液中被测组分峰

　　4

　　面积与内标物峰面积的比值为纵坐标，以各标准溶液被测组分浓度(ng/mL) 与内标物浓度的比值为横坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量 。用基质标准混合工作溶液的工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素的响应值在仪器测定的线性范围内 。

　　在上述色谱条件和质谱条件下，林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素的参考保留时间见表 4 。

　　表 4 林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素

　　参考保留时间

　　化合物名称

　　保留时间/min

　　林可霉素

　　6 . 96

　　竹桃霉素

　　7 . 36

　　红霉素

　　8 . 06

　　替米考星

　　8 . 36

　　泰乐菌素

　　8 . 48

　　螺旋霉素

　　8 . 67

　　吉他霉素

　　8 . 83

　　交沙霉素

　　9 . 14

　　林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素的标准物质多反应监测( MRM)色谱图参见附录 A 中的图 A. 1 、图 A. 2 、图 A. 3 、图 A. 4 、图 A. 5 、图 A. 6 、图 A. 7 、图A. 8 。林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素添加浓度及其平均回收率的试验数据参见附录 B 中的表 B. 1 。

　　7 . 5 平行试验

　　按试样步骤，对同一试样进行平行试验测定 。

　　7 . 6 空白试验

　　不称取样品，其余均按试样步骤 7 . 1 和 7 . 2 进行 。

　　8 结果计算

　　林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素的测试结果按式(1)计算：

　　X = c

　　式中：

　　X— 试样中被测物残留量，单位为微克每千克(μg/kg) ;

　　cs — 基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL) ;

　　A— 试样溶液中被测物的色谱峰面积;

　　As — 基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积;

　　ci — 试样溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL) ;

　　csi — 基质标准工作溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL) ;

　　Asi — 基质标准工作溶液中内标物的色谱峰面积;

　　Ai — 试样溶液中内标物的色谱峰面积;

　　V— 样液最终定容体积，单位为毫升(mL) ;

　　5

　　GB/T 22964—2008

　　m— 试样溶液所代表试样的质量，单位为克(g) 。

　　计算结果应扣除空白值 。

　　9 精密度

　　9 . 1 一般规定

　　本标准的精密度数据是按照 GB/T 6379 . 1 和 GB/T 6379 . 2 的规定确定的，其重复性和再现性的值是以 95%的可信度来计算 。

　　9 . 2 重复性

　　在重复性试验的条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限 r，河豚鱼和鳗鱼中林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素添加浓度范围及重复性方程见表 5 。

　　表 5 林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素

　　添加浓度范围及重复性和再现性方程 单位为微克每千克

　　化合物名称

　　添加浓度范围

　　重复性限 r

　　再现性限 R

　　林可霉素

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 1 . 031 9 lgm- 1 . 019 9

　　lgR= 1 . 187 9 lgm-0 . 678 2

　　竹桃霉素

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 0 . 733 7 lgm-0 . 783 5

　　lgR= 0 . 822 5 lgm-0 . 440 2

　　红霉素

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 0 . 996 2 lgm- 1 . 013 6

　　lgR= 0 . 939 9 lgm-0 . 479 5

　　替米考星

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 1 . 292 5 lgm- 1 . 234 1

　　lgR= 1 . 093 1 lgm-0 . 576 0

　　泰乐菌素

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 0 . 890 5 lgm- 1 . 010 4

　　lgR= 0 . 982 8 lgm-0 . 599 4

　　螺旋霉素

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 1 . 027 6 lgm- 1 . 106 7

　　lgR= 0 . 896 9 lgm-0 . 438 9

　　吉他霉素

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 0 . 940 3 lgm- 1 . 007 7

　　lgR= 0 . 977 1 lgm-0 . 543 4

　　交沙霉素

　　2 . 0 ~ 50 . 0

　　lgr= 0 . 816 3 lgm-0 . 936 2

　　lgR= 0 . 907 3 lgm-0 . 503 7

　　注：m为两次测定值的算术平均值 。

　　如果差值超过重复性限r，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定 。

　　9 . 3 再现性

　　在再现性试验的条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限 R，河豚鱼和鳗鱼中林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素的添加浓度范围及再现性方程见表 5 。

　　6

　　GB/T 22964—2008

　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素标准物质多反应监测( MRM)色谱图，分别见图 A. 1 、图 A. 2 、图 A. 3 、图 A. 4 、图 A. 5 、图 A. 6 、图 A. 7 、图 A. 8 。

　　图 A.1 林可霉素标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　图 A.2 竹桃霉素标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　图 A.3 红霉素素标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　图 A.4 替米考星标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　7

　　GB/T 22964—2008

　　图 A.5 泰乐菌素标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　图 A.6 螺旋霉素标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　图 A.7 吉他霉素标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　图 A.8 交沙霉素标准物质多反应监测(MRM)色谱图

　　8

　　GB/T 22964—2008

　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　回 收 率

　　本方法中林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素和交沙霉素添加浓度及其平均回收率的试验数据见表 B. 1 。

　　表 B.1 林可霉素 、竹桃霉素 、红霉素 、替米考星 、泰乐菌素 、螺旋霉素 、吉他霉素

　　和交沙霉素添加浓度及其平均回收率的试验数据

　　化合物名称

　　添加浓度/(μg/kg)

　　平均回收率/%

　　林可霉素

　　2 . 0

　　4 . 0

　　8 . 0

　　20 . 0

　　91 . 0

　　93 . 9

　　92 . 5

　　87 . 2

　　竹桃霉素

　　2 . 0

　　4 . 0

　　8 . 0

　　20 . 0

　　106 . 6

　　103 . 1

　　90 . 3

　　91 . 2

　　红霉素

　　2 . 0

　　4 . 0

　　8 . 0

　　20 . 0

　　98 . 1

　　93 . 0

　　85 . 3

　　93 . 4

　　替米考星

　　2 . 0

　　4 . 0

　　8 . 0

　　20 . 0

　　86 . 8

　　94 . 2

　　86 . 8

　　88 . 6

　　泰乐菌素

　　2 . 0

　　4 . 0

　　8 . 0

　　20 . 0

　　85 . 8

　　88 . 9

　　88 . 7

　　91 . 9

　　螺旋霉素

　　2 . 0

　　4 . 0

　　8 . 0

　　20 . 0

　　96 . 2

　　87 . 8

　　92 . 4

　　94 . 4

　　吉他霉素

　　2 . 0

　　4 . 0

　　8 . 0

　　20 . 0

　　96 . 4

　　99 . 1

　　84 . 9

　　83 . 4