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GB/T 24829-2009 毛刺线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法

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资料介绍

  ICS 65 . 020 . 0 1 B 16

  中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

  GB/T 24829—2009

  毛刺线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法

  Identification ofTrichodorusspeciesasvirusvectorsfor

  importand exportquarantine

  2009-12-15 发布 2010-06-01 实施

  中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

  

  发

  

  布

  GB/T 24829—2009

  目 次

  前言 Ⅰ

  1 范围 1

  2 规范性引用文件 1

  3 鉴定依据 1

  4 仪器和用具 1

  5 试剂 1

  6 现场检疫 2

  7 实验室检验 2

  8 形态学鉴定 2

  9 结果判断 4

  10 样品保存 4

  附录 A(资料性附录) 毛刺线虫传毒种类基本信息表 5

  附录 B(资料性附录) 线虫分离方法 6

  附录 C(资料性附录) 线虫玻片标本制作方法 7

  附录 D(资料性附录) 4 种传毒毛刺属线虫测计值表 8

  附录 E(资料性附录) 毛刺属种类鉴定多歧检索表(雄虫) 9

  附录 F(资料性附录) 毛刺属种类鉴定多歧检索表(雌虫) 13

  附录 G(资料性附录) 多歧检索表应用参考图 17

  附录 H(资料性附录) 4 种传毒种形态图 22

  参考文献 26

  GB/T 24829—2009

  前 言

  本标准的附录 A 、附录 B、附录 C、附录 D、附录 E 、附录 F、附录 G 和附录 H 均为资料性附录 。

  本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归 口 。

  本标准起草单位:中华人民共和国宁波出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、广东出入境检验检疫局,云南出入境检验检疫局 、浙江大学 。

  本标准主要起草人:顾建锋 、赵立荣 、陈先锋 、郑炜 、李戌清 、杜宇 。

  Ⅰ

  GB/T 24829—2009

  毛刺线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法

  1 范围

  本标准规定了毛刺线虫属传毒种类的检疫鉴定方法 。

  本标准适用于植物 、介质及土壤中毛刺线虫属传毒种类的检疫和鉴定 。

  2 规范性引用文件

  下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是标注 日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本 。凡是不标注 日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 。

  SN/T 1157 进出境植物苗木检疫规程

  SN/T 1158 进出境植物盆景检疫规程

  3 鉴定依据

  中文名:毛刺线虫属 。

  英文名:stubby root nematode 。

  毛刺线 虫 属(Trichodorus Cobb , 1913) 隶 属 于 线 虫 门 [ Nematoda (Rudolphi , 1808) Lankester , 1877],无侧尾腺纲(Adenophorea Linstow, 1905) , 三矛 目 (Triplonchida Cobb , 1922) ,膜皮亚 目 (Diph- therophorina Coomans & Loof , 1970),毛刺总科[Trichodoridea (Thorne, 1935) Siddiqi , 1974],毛刺科 [Trichodoridae (Thorne, 1935) Siddiqi , 1974] , 毛刺亚科(Trichodorinae Thorne, 1935) 。

  毛刺线虫属至今已发现 56 种,为多年生草本或木本植物的根部迁徙性外寄生线虫 。不但直接取食植物根系造成植物根系粗短 、肿大 、侧根增多,并引起寄主营养不良 、生长失调等危害,更严重的是已知其中有 4 种能传播烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus, TRV) 和豌豆早褐病毒(pea early-browning vi- rus, PEBV)等病毒(参见附录 A) 。它们分别是圆筒毛刺线虫(Trichodoruscylindricus Hooper,1962) 、原始毛刺线虫[Trichodorusprimiti℃us(de Man, 1880) Micoletzky, 1922] 、相似毛刺线虫(Trichodorus similisSeinhorst , 1963)和具毒毛刺线虫(Trichodorus℃iruliferus Hooper, 1963) 。

  毛刺线虫主要通过带根苗木 、土壤及介质传播,其雌 、雄虫形态学特征是种类鉴定的主要依据,寄主范围和地理分布等信息可供参考(参见附录 A) 。

  4 仪器和用具

  4 . 1 仪器

  生物显微镜(50 倍 ~ 1 000 倍)、体 视 显 微 镜(10 倍 以 上,具 透 射 光 源)、电 热 恒 温 培 养 箱 、移 液 器(20 μL ~ 200 μL) 、离心机(2 000 r/min 以上)。

  4 . 2 用具

  钟面皿或培养皿 、盖玻片 、载玻片 、剪刀 、挑针 、酒精灯 、线虫滤纸或纱布 、500 μL 塑料管 、细胞培养皿 、密闭塑料盒 、漏斗 、漏斗架 、乳胶管 、止水夹 、加热板 、分样筛(500 目)。

  5 试剂

  4%甲醛 、甘油 、指甲油 、石蜡 、溶液 Ⅰ (96%乙醇 ∶ 甘油 ∶ 蒸馏水= 20 ∶ 1 ∶ 79) 、溶液 Ⅱ(甘油 ∶ 96%乙醇= 1 ∶ 19) 。

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  GB/T 24829—2009

  6 现场检疫

  注意观察苗木的生长状况 、根部为害状,以及是否带介质 、土壤等 。重点选取有生长不良或粗短根等症状的苗木及根际介质或土壤,如无可疑症状则按要求随机取样 。取样后立即置密封塑料袋,标记后及时送实验室检测 。

  具体抽样比例按 SN/T 1157 和 SN/T 1158 执行 。

  7 实验室检验

  7 . 1 线虫分离

  线虫分离方法参见附录 B 。

  7 . 2 体视显微镜镜检

  毛刺属线虫多数体长 500 μm ~ 1 000 μm,放大 10 倍以上可见 。虫体呈圆柱形,短胖,行动缓慢 。

  7 . 3 标本制作

  若发现可疑毛刺属线虫,需制作临时玻片或永久玻片(参见附录 C) 。

  7 . 4 生物显微镜观察 、摄影和测量

  应针对雌 、雄虫主要鉴定特征仔细观察并显微摄影,重点包括整体形态 、齿针 、雌虫阴道骨化结构及侧体孔 、雄虫交合刺及泄殖腔前附着器等,并在每张图片上加相应标尺 。

  需观察 、测量获得多岐检索表中各鉴定特征数字代码(参见附录 D、附录 E 、附录 F、附录 G) ,并计算a、b 、V 等值 。样品足够时,应观察和拍摄雌 、雄虫各 15 条以上 。

  8 形态学鉴定

  8 . 1 毛刺属形态鉴定特征

  雄虫:热杀死后虫体尾部显著腹弯,呈“J ”形,表皮不强烈膨胀,后食道腺通常不覆盖肠(但有时背面或腹面覆盖肠)。通常有 1 个 ~ 3 个 腹 中 颈 乳 突,偶 尔 缺 或 有 4 个,一 般 于 齿 针 基 部 和 神 经 环 之 间 具1 对侧颈孔 。精子大,具呈香肠形或圆形的大精核 。交合刺腹弯,光滑或具有纹饰 、刚毛或缘膜 。交合刺悬肌形成显著的悬肌囊包围交合刺,无交合伞(除 T.paracedarus和 T.cylindricus外)。 通常有 3 个泄殖腔前附着器,很少为 2 、4 或 5 个,通常至少有 1 个在缩回交合刺区域内 。斜纹交配肌延伸到距缩回交合刺基端数倍体宽处 。

  雌虫:热杀死后略向腹面弯曲,双生殖腺对伸,有受精囊(除 T.nanjingensis外)。 阴道约占半个体宽,阴道收缩肌发达,骨化结构显著 。 阴门孔状或横裂,很少纵裂 。通常有 1 对 ~ 4 对侧体孔,其中 1 对侧体孔位于阴门附近一个体宽内,并且通常位于阴门后 。肛门位于近末端,尾短圆,有 1 对尾孔 。

  雌虫阴道骨化结构的形状以及雄虫交合刺的形状是最重要的种类鉴定依据,其他主要鉴定特征还有齿针长度 、交合刺长度 、泄殖腔前附着器 、腹中颈乳突 、交合刺的纹饰 、雌虫侧体孔 、引带等 。

  8 . 2 传毒种类形态鉴定特征

  传毒种类形态鉴定特征参见附录 H 。

  8 . 2 . 1 圆筒毛刺线虫(T.cylindricus Hooper,1962)

  雄虫:热杀死后虫体后部较直 。排泄孔前有 3 个腹中颈乳突,第 1 个腹中颈乳突位于齿针区域内,在齿针基部稍后有 1 对侧颈孔 。具 3 个泄殖腔前附着器,最后一个位于缩回交合刺区域内 。交合刺通常具光滑的柄状体,杆部前具横纹和刚毛,杆部后膨大且光滑,具较小的交合伞 。

  雌虫:热杀死时虫体向腹面微弯曲,食道与肠从腹面略重叠,其他前部特征与雄虫相同 。 阴道为桶状,阴门骨化结构发育良好,侧面观为圆三角形,且三角形尖端指向阴门 。 阴门腹面观为一短横裂,有1 对阴门后体孔 。

  与近似种比较:圆筒毛刺线虫雄虫与 T.cottieri、T.obscurus相似,三者交合刺的杆后部膨大,且最

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  GB/T 24829—2009

  后一个泄殖腔前附着器明显位于缩回交合刺区域内 。但三者在交合刺大小及形态 、腹中颈乳突的数量(分别为 3 个 、1 个 、0 个)、热杀死后虫体后部形态(圆筒毛刺 线 虫 虫 体 直 且 具 交 合 伞,而 T.cottieri和T.obscurus虫体向腹面弯曲 、不具交合伞)等方面不同 。另外,圆筒毛刺线虫雄虫与 T.paracedarus也很相似,两者虫体后部均较直 、具交合伞 、交配肌较该属典型的交配肌弱,但两者可依据交合刺形态区分 。 圆筒毛刺线虫 、T.cottieri、T.obscurus雌虫阴门均为横裂,但可依据阴门骨化结构的形态区分 。

  8 . 2 . 2 原始毛刺线虫[T.primitivus(deMan,1880) Micoletzky,1922]

  雄虫:排泄孔位于神经环对应处或稍靠后 。排泄孔前具腹中颈乳突 3 个,第一个位于齿针的中部对应处,第二个位于齿针的基部对应处,第三个在神经环稍前对应处 。 1 对侧颈孔位于齿针的后三分之 一处 。精子大,具横纹,精核香肠形,长约 9 μm 。交合刺基部宽约 3 μm ~ 4 μm,杆部向后渐窄,末端宽约1 μm 。交合刺外伸时中部可见几根细刚毛 。 引带形状特殊,前部凸起,大部分在交合刺之间 。具泄殖腔前附着器 3 个,最后一个位于交合刺基部对应处 。

  雌虫:具近阴门侧体孔 1 对,位于阴门稍后,另 1 对位于阴门前 3 个体宽处,还有 1 对位于阴门前5 个 ~ 7 个体宽处 。阴道骨化结构明显,呈棒状,与阴道平行 。 阴门为微小的横裂,阴道菱形至长菱形 。食道球与肠邻接,不从背面或腹面覆盖肠 。

  与近似种比较:原始毛刺线虫交合刺形状与 T.aquitanensis和 T.hooperi相似,都是基部宽,向末端渐狭,杆部细 。该线虫与 T.aquitanensis都具有 3 个腹中颈乳突,且其中前 2 个都在齿针区(T.hoo- peri只有 2 个腹中颈乳突)。该线虫雌虫阴门横裂与 T.aquitanensis相似,骨化结构的走向与具毒毛刺线虫相似,都是与阴道平行 。原始毛刺线虫与 T.aquitanensis的主要区别是雄虫交合刺形态和雌虫阴道骨化结构:T.aquitanensis的阴道骨化结构为四边形,而原始毛刺线虫为棒状 。该线虫与具毒毛刺线虫的区别为雄虫的交合刺形状不同,雌虫的阴道骨化结构和阴门裂口形状不同 。

  8 . 2 . 3 相似毛刺线虫(T.similisseinhorst,1963)

  雄虫:排泄孔在神经环后约 1 个体宽处,排泄孔前有 3 个腹中颈乳突,第一个通常位于齿针后四分之一对应处,很少在齿针基部 。在齿针基部附近两侧有明显的侧颈孔 。精子大,细胞核不规则椭圆形, 2 μm×5 . 5 μm ~ 6 . 5 μm 。交合刺向腹面弯曲,基部缢缩呈头状,杆部中间略宽,无横纹,后渐细,末 端钝 。 回缩的交合刺通常表面光滑,而伸出的交合刺狭窄的颈部可见有几根细刚毛 。 引带长约 16 μm,引带头部具钩,端部膨大成球状 。有 3 个泄殖腔前附着器,最后一个位于与交合刺基部对应处或略靠前 。

  雌虫:紧靠阴门后有一对侧体孔 。 阴门横裂,阴道圆形至菱形,仅在阴道基部可见阴道收缩肌 。 阴道骨化结构大而明显,圆三角形 。

  与近似种比较:相似毛刺线虫与 T.variopapillatus在交合刺的形状(向腹面弯,具柄状突起)、有3 个腹中颈乳突(其中 1 个位于齿针区内)、具 3 个泄殖腔前附着器以及雌虫阴门裂形状上相似,但相似毛刺线虫雄虫比 T.variopapillatus短,交合刺更粗且有细刚毛,而 T.variopapillatus交合刺更细,无细刚毛 。另外,相似毛刺 线 虫 雌 虫 阴 道 圆 形 至 菱 形 、骨 化 结 构 为 中 等 大 小 圆 三 角 形 、侧 体 孔 1 对,而T.variopapillatus雌 虫 阴 道 筒 形 、骨 化 结 构 为 大 圆 三 角 形 至 梯 形 、侧 体 孔 2 对 。 相 似 毛 刺 线 虫 与

  T.complexus和 T.coomansi交合刺形态相似,但腹中颈乳突的数量和交合刺形状不同 。

  8 . 2 . 4 具毒毛刺线虫(T.viruliferus Hooper,1963)

  雄虫:排泄孔前具腹中颈乳突 3 个,排列间隔几乎相等,第一个通常明显位于齿针区内,第二个位于齿针基部 。 紧靠齿针基部后两侧的侧颈孔明显 。精子大,精核大 、香肠形,约 2 μm×9 μm 。交合刺头部不明显无横纹,近基部宽,向腹面弯曲,渐渐变狭,在中部微收缩,后加宽,再向末端渐细 。交合刺中部收缩处有数根细刚毛 。 引带位于交合刺间,端部背侧明显凸起,似鞋跟 。具泄殖腔前附着器 3 个,最后 一个位于缩回交合刺基部稍前 。

  雌虫:阴门后有一对侧体孔,阴门开口为孔状 。 阴道骨化结构小,呈卵形,以 45 °角与阴道倾斜或与阴道几乎平行 。 阴道长宽大致相当,呈菱形,阴道收缩肌发达 。

  与近似种比较:具毒毛刺 线 虫 与 T.lusitanicus、T.azorensis、T.beirensis、T.velatus相 似,都 表 现

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  GB/T 24829—2009

  为雄虫交合刺中部有缢缩并具细毛 。但可以从交合刺中部缢缩的程度 、缢缩区的长度以及交合刺杆部较细等特征与其他种区分 。雌虫的主要区别是阴道和阴道骨化结构的形态差异 。

  9 结果判断

  将观察 、测量获得的各鉴定特征数字代码与多歧检索表按字母顺序进行核对,如果所有数字均与某种相符,则初步鉴定为该种 。

  若初步鉴定为圆筒毛刺线虫 、原始毛刺线虫 、相似毛刺线虫或具毒毛刺线虫,且符合第 8 章对应形态鉴定特征以及测计值,可判为检出毛刺线虫属传毒种,其寄主和地理分布等信息可供参考 。

  10 样品保存

  10 . 1 苗木保存

  若鉴定为毛刺线虫属传毒种类,应对带病苗木的根部及整体摄影,置于密封塑料袋中 4 ℃左右保存2 个月以上,以备复验 。

  10 . 2 线虫保存

  若鉴定为毛刺线虫属传毒种类,应将剩余的线虫杀死 、固定制成永久玻片保存;也可用 4%甲醛固定后长期保存 。标签中应写明样品编号 、制作人 、制作时间 、寄主 、产地 、种名等信息 。

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  GB/T 24829—2009

  附 录 A

  (资料性附录)

  毛刺线虫传毒种类基本信息表

  表 A.1 毛刺线虫传毒种类基本信息表

  种类

  分布

  寄主范围

  所传病毒种类

  圆筒毛刺线虫(T.cylindricus)

  英 国 、丹 麦 、比 利 时 、德国 、波兰 、瑞典 、瑞士 、法国 、意 大 利 、荷 兰 、西 班牙 、美国(佛罗里达)

  该种线虫通常 存 在 于 沙 质 土 壤 中,取食寄主范围较毛刺线虫属其他种窄 。路 边 草 皮 和 牧 场 是 其 最 佳寄主,但 马 铃 薯 、莴 苣 、甜 菜 、草 莓 、常绿针叶树根围土壤中也常常可以分离到该种线虫 。

  烟草脆裂病毒(TRV)

  原始毛刺线虫(T.primiti℃us)

  英国 、爱 尔 兰 、比 利 时 、德国 、波兰 、瑞士 、瑞典 、法国 、意大利 、荷兰 、挪威 、丹麦 、保 加 利 亚 、葡 萄 牙 、罗马 尼 亚 、斯 洛 伐 克 、俄罗斯 、美国 、新西兰

  主要有甜菜 、卷 心 菜 、红 花 苜 蓿 、含羞草 、芹 菜 、玉 米 、紫 花 苜 蓿 、黄 瓜和烟 草 等 。其 他 有 关 的 植 物 还 有燕麦 、黄 杨 、茶 花 、棉 花 、灰 胡 桃 树 、胡枝 子 、含 羞 草 、松 属 、豌 豆 、马 铃薯 、普通繁缕 、苹果 、西梅脯 、冠状银莲 花 、草 莓 、甘 蓝 、李 属 、黑 穗 醋栗 、葡 萄 、胡 萝 卜 、北 美 云 杉 、欧 洲云杉 、长白松等 各 种 针 叶 木 和 阔 叶木 、薄荷 、酸 模 、橄 榄 、英 国 榆 、柑 橘和菊花等 。

  烟草脆裂病毒(TRV) 、豌豆早褐病毒(PEBV)

  相似毛刺线虫(T.similis)

  英 国 、比 利 时 、德 国 、波兰 、瑞士 、法国 、意大利 、荷兰 、挪威 、希腊 、瑞典 、丹麦 、保 加 利亚 、罗 马 尼亚 、斯洛伐克 、俄罗斯 、美国(佛罗里达 、密西根)

  主要分布于各 种 林 地 、草 坪 和 耕 地等,有关 植 物 包 括 地 中 海 柏 树 、高粱 、梨 、唐菖蒲属 、云杉属 、大麦 、油菜 、烟草 、草莓 、藜 、越橘 、桃 、英国核桃 、欧 洲 李 子 、普 通 繁 缕 、胡 萝卜 、紫花苜蓿 、多 年 生 黑 麦 草 、白 三叶草 、大 麦 、洋 葱 、辣 椒 、豌 豆 和 马铃薯等 。

  烟草脆裂病毒(TRV)

  具毒毛刺线虫(T.℃iruliferus)

  英 国 、比 利 时 、德 国 、波兰 、法国 、意大利 、荷兰 、西班 牙 、瑞 士 、保 加 利 亚 、匈牙利 、瑞 典 、美 国(佛 罗里达)

  主要 包 括 小 麦 、黑 麦 、大 麦 、马 铃薯 、苹果 和 豌 豆 等,其 他 相 关 植 物还有 甜 菜 、禾 本 科 植 物 、葡 萄 、玉米 、橄榄 、梨 、桃 、番 茄 、洋 蓟 、辣 椒 、杨树 、榛 实 、橡 树 、柑 橘 、无 花 果 、柠檬 、胡桃 、百慕 达 草 、蒲 公 英 属 和 白松等 。

  烟草脆裂病毒(TRV) 、豌豆早褐病毒(PEBV)

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  GB/T 24829—2009

  附 录 B

  (资料性附录)线虫分离方法

  B.1 漏斗法

  将 10 cm ~ 15 cm 直径的漏斗固定在支架上(见图 B. 1) ,下端接一段乳胶管,管的近末端用止水夹夹紧 。将待分离的样品用纱布包好(根或其他植物组织应先剪成小段),轻轻放入盛有适量清水的漏斗(使样品略露出水面为宜)。20 ℃ ~ 25 ℃左右静止 24 h ~ 48 h后,打开止水夹,用培养皿或钟面皿接取线虫液约 5 mL ~ 10 mL,镜检 。

  1 — 漏斗;

  2 — 用纱布包裹的样品;

  3 — 乳胶管;

  4 — 止水夹 。

  图 B.1 漏斗分离装置

  B.2 浅盘分离法

  浅盘分离法装置(见图 B. 2)由两只不锈钢浅盘 、线虫滤纸或纱布组成,上盘底面为 10 目 的粗筛网,下盘为正常浅盘 。分离线虫时,将线虫滤纸或纱布平铺在上盘的筛网上,然后将待分离的样品撒铺在表面,从两只浅盘的夹缝中加水,以刚淹没供分离的样品为宜 。 20 ℃ ~ 25 ℃左右静止 24 h ~ 48 h 后,移去上盘及样品,用 500 目筛网收集线虫,然后将线虫液转移到培养皿或钟面皿,镜检 。

  1 — 上盘;

  2 — 下盘 。

  图 B.2 浅盘分离装置

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  附 录 犆

  (资料性附录)

  线虫玻片标本制作方法

  犆.1 临时玻片制作

  先在载玻片中央加 1 小滴水,然后在体视显微镜下用线虫挑针挑取数条线虫至小水滴中;或直接用200 μL移液器吸取数条线虫,滴加到载玻片上 。手持载玻片在酒精灯火焰上来回 5 s ~ 6 s,使线虫恰好被杀死,盖上盖玻片 。

  犆.2 永久玻片制作

  犆.2 . 1 在解剖镜下,用移液器反复从培养皿中吸取线虫,转移到 500 μL 塑料管中,尽量使多数线虫被转移 。2 000 r/min 离心 3 min,使线虫沉降到塑料管底部 。

  犆.2 . 2 用移液器将塑料管上层的水吸出,使管中仅留少量的线虫液(约 10 μL) ,然后向管中加入 95 ℃的 4%甲醛,杀死线虫 。静置数天,固定线虫(可长期保存)。

  犆.2 . 3 将塑料管 2 000 r/min 离心 3 min,吸去上层甲醛溶液后,用移液器将线虫移至细胞培养皿中,加入溶液 Ⅰ 至皿的一半体积,再将皿置于加有 1/10 体积 96%乙醇的密闭塑料盒中,置 40 ℃恒温培养箱中放置 12 h 。

  犆.2 . 4 仔细用移液器吸去皿中大部分溶液 Ⅰ(注意不要移走线虫),加满溶液 Ⅱ ,置于 40 ℃恒温培养箱中放置 12 h 以上,直至乙醇完全挥发 。

  犆.2 . 5 取一干净载玻片,在中间加一小滴甘油,在解剖镜下用挑针将已完全脱水的雌 、雄线虫各数条移至甘油滴的中央,排列均匀 。取与线虫直径大小一致的玻璃丝 3 根 ~ 4 根,放在甘油滴的边缘 。

  犆.2 . 6 在甘油滴两边对称放两块小蜡块,加盖玻片,置于 64 ℃的加热板上加热,待蜡块融化后 自然冷却 。用指甲油封片,待指甲油干后再封 1 次 。贴上标签,写明样品号 、寄主 、产地 、制作 日期等,放入标本盒中(保存时注意保持玻片水平,以防线虫滑动)。

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  GB/T 24829—2009

  附 录 D

  (资料性附录)

  4 种传毒毛刺属线虫测计值表

  表 D.1 4 种传毒毛刺属线虫测计值表

  传毒线虫种类

  测 计 值

  L(μm)

  a

  b

  St(μm)

  V

  Sp(μm)

  原始毛刺线虫

  雄虫

  822±55

  (500 ~ 1 000)

  18 . 6 ~ 38 . 9

  4 . 0 ~ 6 . 5

  52 . 0±3 . 1

  (47 . 0 ~ 58 . 5)

  —

  45 . 0±5 . 3

  (32 . 0 ~ 54 . 0)

  雌虫

  769 ± 33

  (500 ~ 950)

  18 . 0 ~ 28 . 0

  4 . 4 ~ 5 . 8

  55 . 0±2 . 3

  (28 . 0 ~ 57 . 0)

  57 . 5 ±0 . 6

  (54 . 0 ~ 59 . 2)

  —

  相似毛刺线虫

  雄虫

  678±58

  (550 ~ 1 059)

  19 . 5 ~ 32 . 7

  4 . 3 ~ 11 . 3

  39 . 2±3 . 1

  (35 . 0 ~ 50 . 0)

  —

  34 . 2±1 . 7

  (30 . 0 ~ 44 . 0)

  雌虫

  692±56

  (600 ~ 1 000)

  17 . 9 ~ 30 . 0

  4 . 6 ~ 11 . 0

  46 . 5 ± 2 . 3

  (36 . 0 ~ 52 . 0)

  54 . 7±4 . 2

  (43 . 0 ~ 60 . 0)

  —

  具毒毛刺线虫

  雄虫

  652±35

  (616 ~ 890)

  17 . 6 ~ 33 . 0

  4 . 2 ~ 11 . 5

  36 . 6 ± 2 . 3

  (32 . 0 ~ 53 . 0)

  —

  24 . 2±1 . 3

  (22 . 0 ~ 37 . 0)

  雌虫

  638±49

  (552 ~ 919)

  17 . 3 ~ 28 . 0

  3 . 9 ~ 12 . 4

  37 . 4±1 . 2

  (36 . 0 ~ 56 . 0)

  55 . 1 ± 1 . 0

  (51 . 0 ~ 62 . 0)

  —

  圆筒毛刺线虫

  雄虫

  710

  (630 ~ 800)

  20 . 7

  (18 . 5 ~ 22 . 7)

  4 . 9

  (4 . 1 ~ 5 . 7)

  40 . 0

  (37 . 0 ~ 43 . 0)

  —

  37 . 0

  (33 . 0 ~ 49 . 0)

  雌虫

  690

  (580 ~ 770)

  20 . 8

  (17 . 9 ~ 22 . 8)

  4 . 8

  (4 . 3 ~ 5 . 8)

  40 . 0

  (35 . 0 ~ 45 . 0)

  58 . 0

  (53 . 0 ~ 65 . 0)

  —

  注 1 : L— 体长;a— 体长/最大体宽;b— 体 长/虫 体 前 端 至 食 道 与 肠 连 接 处 的 距 离;St(onchiostyle) — 齿针长;Sp(spicule) — 交合刺长;V— 虫体前端至阴门的距离 ×100/体长 。

  注 2:表内数据参考 Decraemer , 1995 。

  8

  附 录 E

  (资料性附录)

  毛刺属种类鉴定多歧检索表(雄虫)

  9

  GB/T 2 4 8 2 9 — 2 0 0 9

  表 E.1 毛刺属种类鉴定多歧检索表(雄虫)

  毛刺属线虫种类

  鉴定特征字母及数字代码

  A

  B

  C

  D

  E

  F

  G

  H

  I

  J

  K

  L

  M

  N

  O

  P

  T.aequalis

  210

  32

  21

  2

  0

  3(4)

  11(0)

  33(4)

  11

  500

  33

  22

  170

  11

  350

  2

  T.altaicus

  120

  21

  21

  2

  0

  3

  11(0)

  33

  11

  340

  33

  11

  270

  11

  500

  2

  T.aquitanensis

  210

  23

  12

  3

  22

  3

  11

  22

  11

  500

  33

  22

  170

  11

  100

  2

  T.azorensis

  210

  32

  11

  3(24)

  21

  3

  10

  33

  11

  500

  33

  44

  160

  11

  100

  2

  T.beirensis

  210

  21

  11

  3(4)

  11

  3

  10

  33(2)

  11

  500

  33

  46

  160

  11

  100

  2

  T.borai

  100

  22

  11

  1

  11

  3

  11

  22

  11

  200

  33

  11

  170

  66

  500

  2

  T.borneoensis

  210

  23

  22

  2

  0

  3

  22

  22

  11

  203

  33(2)

  32

  270

  11

  500(3)

  2

  T.californicus

  231

  32

  23

  1

  0

  3

  11

  22

  11

  234

  33

  22

  260

  66

  230

  2

  T.carlingi

  210

  32

  22

  2

  0

  3

  0

  33

  11

  400

  33

  33

  187

  11

  300

  2

  T.cedarus

  210

  23

  21

  3(214)

  0

  3(4)

  11

  33

  11

  210

  32

  22

  206

  11

  500

  2

  T.complexus

  200

  22

  22

  2

  0

  3

  10

  22

  11

  500

  22

  22

  270

  66

  500

  2

  T.coomansi

  230

  23

  22

  2(3)

  0

  3

  11

  33

  11(3)

  200

  22

  22

  270

  11

  200

  2

  T.cottieri

  230

  23

  22

  1

  0

  3

  11

  22

  11

  200

  33

  23

  270

  11

  600

  2

  T.cylindricus

  120

  21

  12

  3

  11

  3

  11

  33(2)

  22(4)

  200

  33

  33

  562

  11

  103

  1

  T.dilatatus

  230

  33

  22

  1

  0

  3

  21

  33

  11

  200

  33

  22

  260

  66

  300

  2

  T.eburneus

  231

  23

  22

  1

  0

  3(4)

  0(1)

  22

  11(3)

  300

  33(2)

  12

  270

  11

  200

  2

  GB/T 2 4 8 2 9 — 2 0 0 9

  10

  表 E.1(续)

  毛刺属线虫种类

  鉴定特征字母及数字代码

  A

  B

  C

  D

  E

  F

  G

  H

  I

  J

  K

  L

  M

  N

  O

  P

  T.elefjohnsoni

  120

  23

  21

  2

  0(1)

  3

  11

  33

  11(3)

  520

  32

  24

  370

  11

  300

  2

  T.elegans

  320

  44

  23

  1

  0

  3

  11

  33

  11

  100

  33

  22

  270

  66

  300

  2

  T.giennensis

  213

  23

  21

  2(1)

  0(1)

  3(45)

  11(0)

  33

  33(12)

  500

  33(2)

  22(4)

  160

  11

  100

  2

  T.gilanensis

  323

  22

  22

  3

  2

  3

  10

  23

  11

  500

  33

  33

  170(6)

  11

  700

  2

  T.guangzhouensis

  120

  12

  11

  3

  0

  3

  10

  22

  11

  200

  33

  44

  170

  11

  500

  2

  T.hooperi

  230

  23

  22

  2

  0

  3(4)

  11

  33(2)

  11

  100

  22

  11

  270

  11

  300(35)

  2

  T.intermedius

  200

  33

  22

  1

  0

  3

  22

  33

  11

  200

  33(2)

  22

  260

  66

  300

  2

  T.iu℃entus

  100

  11

  21

  1

  0

  3

  11

  33

  31

  340

  22

  44

  470

  11

  200

  2

  T.jeonjuensis

  200

  33

  22

  3

  0

  3

  11

  33

  11

  200

  22

  11

  270

  11

  500

  2

  T.kilianae

  230

  22

  22

  1

  0

  3(4)

  11(0)

  33

  13

  300

  22(3)

  45

  167

  11

  200

  2

  T.lusitanicus

  231

  21

  11

  3

  12

  3

  0(1)

  22

  13

  200

  33

  44

  160

  66

  100

  2

  T.magnus

  300

  33

  22

  1

  0

  3

  10

  33

  11

  200

  33

  46

  176

  11

  200

  2

  T.minzi

  230

  23

  33

  2(1)

  0

  3

  11

  33

  33(1)

  200

  11

  33

  470

  11

  700

  2

  T.nanjingensis

  230

  22

  22

  2(10)

  0

  3(4)

  11

  33

  11

  301

  32

  22

  270(6)

  11

  500

  2

  T.obscurus

  231

  33

  23

  0

  0

  3

  11(2)

  23

  11

  200

  32

  22

  270

  66

  300

  2

  T.obtusus

29140507729
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