GB/T 46321-2025 胶粘剂耐真菌生长性的评估

　　ICS 83. 180 CCS G 38

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 46321—2025

　　胶粘剂耐真菌生长性的评估

　　Assessmentoffungalgrowth resistanceofadhesive

　　2025-10-05发布 2026-05-01实施

　　国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 46321—2025

　　目 次

　　前言 Ⅲ

　　1 范围 1

　　2 规范性引用文件 1

　　3 术语和定义 1

　　4 试验原理 1

　　5 标准试验条件 2

　　6 试验器具和材料 2

　　7 培养基和试剂 3

　　8 试验程序 3

　　9 结果评估 7

　　10 试验报告 8

　　附录 A (规范性) 图像识别方法 9

　　附录 B (资料性) 培养基制备 10

　　参考文献 12

　　Ⅰ

　　GB/T 46321—2025

　　前 言

　　本文件按照 GB/T 1. 1—2020《标准化工作导则 第 1部分 :标准化文件的结构和起草规则》的规定起草 。

　　请注意本文件中的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。

　　本文件由中国石油和化学工业联合会提出 。

　　本文件由全国胶粘剂标准化技术委员会(SAC/TC185)归 口 。

　　本文件起草单位 :上海建科检验有限公司 、上海橡胶制品研究所有限公司 、福建省产品质量检验研究院 、旭川化学(苏州)有限公司 、南京自一界科技研发有限公司 、山东沃赛新材料科技有限公司 、长沙乐远化工科技有限公司 、广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) 、广东枧洋新材料有限公司 、上海市闵行区腐蚀科学技术学会 、汉宁化学(上海) 有限公司 、广东裕田霸力科技股份有限公司 、上海朗亿功能材料有限公 司 、烟 台 德 邦 科 技 股 份 有 限 公 司 、上 海 海 关 工 业 品 与 原 材 料 检 测 技 术 中 心 、顶立新材料科技股份有限公司 、山东凯恩新材料科技有限公司 、中国计量大学 。

　　本文件主要起草人 :徐宴华 、沈雁 、胡晓珍 、李素娟 、傅德江 、汪玉蓉 、王涛 、程文会 、李进 、聂露 、缪策 、黄磊 、唐振宇 、窦锦兵 、林华玉 、唐晓峰 、王建斌 、张琳 、杜波 、胡倩 、胡玉华 、李捷 。

　　Ⅲ

　　GB/T 46321—2025

　　胶粘剂耐真菌生长性的评估

　　警示— 本文件使用者需有正规实验室工作的实践经验 。本文件并未指出所有可能的安全问题 ,使用者有责任采取适当的安全和健康措施。

　　1 范围

　　本文件描述了胶粘剂耐真菌生长性的评估方法 ,包括试验原理 、标准试验条件 、试验器具和材料 、培养基和试剂 、试验程序 、结果评估以及试验报告 。

　　本文件适用于胶粘剂在普通环境中耐真菌生长性的评估或经历严酷环境影响后耐真菌生长持久性的评估 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中 , 注 日期的引用文件 ,仅该日期对应的版本适用于本文件 ;不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单) 适用于本文件 。

　　GB/T 2943 胶粘剂术语

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　GB/T 19258. 1 杀菌用紫外辐射源 第 1部分 :低气压汞蒸气放电灯

　　YY 0569 Ⅱ级生物安全柜

　　3 术语和定义

　　GB/T 2943界定的以及下列术语和定义适用于本文件 。

　　3. 1

　　真菌 fungus

　　一类营异养生活 ,不进行光合作用 ,具有真核细胞 ,营养体为单细胞或丝状菌丝 ,细胞壁含有几丁质或纤维素 ,具有无性和有性繁殖特征的生物 。

　　[来源 :GB/T 12728—2006,2. 1. 1] 3.2

　　耐真菌生长性 fungalgrowth resistance

　　耐受甚至抑制真菌在材料上生长和繁殖的性能 。

　　3.3

　　耐真菌生长持久性 persistentfungalgrowth resistance

　　经历严酷环境影响后 ,材料仍具备耐真菌生长的性能 。

　　4 试验原理

　　采用模拟真菌生长环境的方法 ,对预先接种真菌的胶粘剂试件进行培养 。根据试件表面真菌生长情况及真菌面积占比情况进行评估 ,从而确定胶粘剂的耐真菌性能等级 。

　　1

　　GB/T 46321—2025

　　5 标准试验条件

　　实验室温度为(23±2) ℃ ,相对湿度为(50±5) % 。

　　6 试验器具和材料

　　6. 1 试验器具

　　6. 1. 1 无色玻璃试管 :直径 18 mm ,长度 180 mm。

　　6. 1.2 高压蒸汽灭菌锅 :控温范围为 101 ℃ ~ 137 ℃ ,控温精度为 ±2 ℃ 。

　　6. 1.3 烧杯 :容积 500 mL,直径(85±5) mm。

　　6. 1.4 尖头镊子 :不锈钢材质 ,尖头尽可能小 ,减少与玻璃纤维滤膜的接触面积 。

　　6. 1.5 型框 :不锈钢或其他合适材质 , 内部尺寸宜为(100±10)mm× (200±10)mm× (2±0. 2) mm ,本体型和溶剂型通用试件型框示意图见图 1。

　　单位为毫米

　　标引序号说明 :

　　1— 型框 ;

　　2— 基材 。

　　图 1 本体型和溶剂型通用试件型框示意图

　　6. 1.6 刮涂工具 :尺寸宜为 150 mm×70 mm×1 mm 的铝质或其他合适材质的刮板 。

　　6. 1.7 生物安全柜 :符合 YY 0569规定的 Ⅱ级生物安全柜要求 。

　　6. 1. 8 无菌接种环 :10 μL。

　　6. 1.9 生化培养箱 :控温范围为 5 ℃ ~ 50 ℃ ,控温精度为 ±1 ℃ 。

　　6. 1. 10 菌种保存箱 :控温范围为 4 ℃ ~ 10 ℃ ,控温精度为 ±2 ℃ 。

　　6. 1. 11 无菌玻璃珠 :直径 3 mm~ 7 mm。

　　6. 1. 12 无菌三角瓶 :容积 125 mL。

　　6. 1. 13 血球计数板 : 医学和微生物学实验用 。

　　6. 1. 14 无菌培养皿 :直径 90 mm。

　　6. 1. 15 无菌涂布棒 :L 型 。

　　6. 1. 16 恒温恒湿培养箱 :控温范围为 10 ℃ ~ 50 ℃ ,控温精度为 ±1 ℃;相对湿度范围为 50% ~ 95% ,精度为 ±5% 。

　　6. 1. 17 电热鼓风干燥箱 : 控 温 范 围 为 30 ℃ ~ 100 ℃ , 温 度 均 匀 性 不 超 过 ±2 ℃ , 温 度 波 动 度 不 超 过

　　2

　　GB/T 46321—2025

　　±1 ℃ 。

　　6. 1. 18 恒温水浴锅 :控温范围为 40 ℃ ~ 60 ℃ ,温度均匀性不超过 ±2 ℃ ,温度波动度不超过 ±1 ℃ 。

　　6. 1. 19 浸泡箱 : 容量不少于 1. 2 L 的玻璃或其他不影响胶粘剂性能的耐热材 料 制 成 的 容 器 , 具 有 密封性 。

　　6. 1.20 湿热试验箱 :温度可调至( -20 ±2) ℃和(85±2) ℃ ,变温速率为 1 ℃/min,且能满足相对湿度(90±3) % 。

　　6. 1.21 显微镜 :普通光学显微镜 ,放大倍数为 50倍 。

　　6. 1.22 电子天平 :实际分度值为 0. 000 1 g。

　　6. 1.23 pH 计 :分辨率为 0. 1。

　　6. 1.24 真菌生长面积图像识别设备 :见附录 A 中图 A. 1。

　　6.2 试验材料

　　6.2. 1 玻璃纤维滤膜 :直径(70±2) mm。

　　6. 2.2 黑色聚烯烃塑料片 :光泽(60°)宜不大于10.0,反射率宜不大于4.0% ,尺寸宜为 432mm×165mm× (0. 25±0.02)mm。

　　6.2.3 无菌定性滤纸 :尺寸为 40 mm×40 mm。

　　7 培养基和试剂

　　7. 1 一般要求

　　除另有规定 ,所有试验均应使用化学纯或化学纯以上的试剂和符合 GB/T 6682中三级水要求的蒸馏水或去离子水 。

　　7.2 无菌水

　　称取 0. 05 g 吐温 80分散剂加入 1 000 mL水中 ,按 10 mL/支分装于无色玻璃试管(6. 1. 1)内 ,放入高压蒸汽灭菌锅(6. 1. 2)于(121±2) ℃灭菌 20 min后备用 。

　　7.3 营养盐溶液

　　见附录 B 中 B. 1。

　　7.4 营养盐琼脂培养基见 B. 2。

　　7.5 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA)

　　见 B. 3。

　　8 试验程序

　　8. 1 试件制备

　　8. 1. 1 试样

　　胶粘剂样品应在标准试验条件(见第 5 章)下放置至少 24 h 后进行试验 。取样前应将胶粘剂样品混合均匀 。多组分的胶粘剂样品应按产品明示的混合比例要求混合均匀 。若产品有混合比例范围的 ,

　　3

　　GB/T 46321—2025

　　应取其中间值 。

　　8. 1.2 通用试件制备

　　8. 1.2. 1 水基型通用试件制备

　　将试样(8. 1. 1)搅拌均匀后倒入烧杯(6. 1. 3)中 ,用尖头镊子(6. 1. 4)夹住玻璃纤维滤膜(6. 2. 1) 边缘 ,全部浸没于试样中 , 10 s后取出 , 立即平铺于聚四氟乙烯板或其他易剥离的基材上 , 在标准试验条 件(见第 5 章)下养护 7 d,不与聚四氟乙烯板接触的试件面为测试面 ,养护完成后 ,裁切至表 1规定的试件尺寸 。

　　表 1 试件制备数量和尺寸

　　胶粘剂类型

　　试件数量

　　试件尺寸

　　mm

　　水基型

　　3个a

　　(40±2) × (40±2)

　　本体型/溶剂型

　　湿膜(40±2) × (40±2) × (2±0. 2)

　　a 耐真菌生长性和耐真菌生长持久性试验应分别制备 3个试件 。

　　8. 1.2.2 本体型和溶剂型通用试件制备

　　将型框(6. 1. 5)置于黑色聚烯烃塑料片(6. 2. 2)基材上 。将试样(8. 1. 1)制备于型框中 ,使用刮涂工具(6. 1. 6)刮至表面平整 ,避免形成气泡 ,制成试片 。在标准试验条件(见第 5 章)下养护 7 d,养护完成后 ,将试片脱模并裁切至表 1规定的试件尺寸 ,裁切时 ,裁刀距离型框边缘应不小于 10 mm。测试面为不与基材接触的试件面 。

　　8. 1.3 特殊试件制备

　　若试样按以上通用的制备方式无法进行 ,可按产品使用说明要求选择合适的制备方式 、养护条件和养护时间制备试件 ,试件 总 厚 度 不 宜 超 过 10 mm。养 护 完 成 后 , 将 试 件 裁 切 成 尺 寸 为(40±2) mm × (40±2) mm。若因试件尺寸原因无法使用培养皿法(A法)(8. 5. 2. 1) ,可使用悬挂法(B法)(8. 5. 2. 2) 或其他商定方法 。

　　8.2 杀菌处理

　　试验前 ,试验涉及器皿应放入高压蒸汽灭菌锅(6. 1. 2)于(121±2) ℃灭菌 20min后冷却备用 。应在生物安全柜(6. 1. 7)内使用紫外灯对试件进行通体杀菌处理(单面照射不少于 20 min) ,或采用其他合适的杀菌方式进行通体杀菌处理 。

　　8.3 空白对照样品

　　无菌定性滤纸(6. 2. 3) 。

　　8.4 混合真菌孢子液的制备

　　8.4. 1 试验菌种

　　试验所用菌种见表 2,应来自中国普通微生物菌种保藏管理中心或其他国家级菌种保藏管理中心 。经有关方商定后 ,也可增加其他试验菌种 。

　　4

　　GB/T 46321—2025

　　表 2 试验菌种

　　序号

　　菌种中文名称

　　菌种拉丁名称

　　菌株号

　　1

　　黑曲霉

　　Aspergillusniger

　　CGMCCa 3. 5487

　　2

　　黄曲霉

　　Aspergillusflavus

　　CGMCC 3. 3950

　　3

　　宛氏拟青霉

　　Paecilomycesvariotii

　　CGMCC 3. 4253

　　4

　　桔青霉

　　Penicillium citrinum

　　CGMCC 3. 2913

　　5

　　绳状篮状菌

　　Talaromycesfuniculosus

　　CGMCC 3. 3875

　　6

　　绿色木霉

　　Trichodermaviride

　　CGMCC 3. 2941

　　7

　　链格孢

　　Alternaria alternata

　　CGMCC 3. 4255

　　8

　　短柄帚霉

　　Microascusbrevicaulis

　　CGMCC 3. 1914

　　9

　　草本枝孢

　　Cladosporium herbarum

　　CGMCC 3. 2757

　　10

　　出芽短梗霉

　　Aureobasidium pullulans

　　CGMCC 3. 837

　　a CGMCC为中国普通微生物菌种保藏管理中心(China GeneralMicrobiologicalCulture Collection Center) 。

　　8.4.2 菌种培养及保藏

　　在生物安全柜(6. 1. 7)内用无菌接种环(6. 1. 8) 分别接种各种菌种(表 2) 于马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA)(7. 5)上 ,放入生化培养箱(6. 1. 9) ,在 28 ℃ ~ 30 ℃条件下培养至斜面长满真菌孢子 ,培养后置于 4 ℃ ~ 10 ℃的菌种保存箱(6. 1. 10)中保存 ,时间不超过 3 个月 。试验菌株传代次数应在标准菌株的5代以内 。

　　8.4.3 混合真菌孢子液的制备

　　在生物安全柜(6. 1. 7)内用无菌接种环(6. 1. 8)挑取真菌孢子(见 8. 4. 2) ,接种于马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA)(7. 5)上 ,在 28 ℃ ~ 30 ℃条 件 下 培 养 7 d~ 14 d, 当 培 养 基 表 面 长 满 真 菌 孢 子 时 , 加 入10 mL 无菌水(7. 2) ,在生物安全柜(6. 1. 7) 内用无菌接种环(6. 1. 8) 在无菌操作条件下轻轻地刮取真菌培养物表面的真菌孢子 ,制成真菌孢子悬浮液 。

　　将真菌孢子悬浮液 倒 入 带 有 塞 子 并 预 先 装 有 45 mL 无 菌 水 (7. 2) 和 10 个 ~ 15 个 无 菌 玻 璃 珠(6. 1. 11)的 125 mL无菌三角瓶(6. 1. 12)中 ,用力振荡无菌三角瓶(6. 1. 12) ,将带有无菌定性滤纸(6. 2. 3)的灭菌漏斗或无菌双层纱布置于无菌三角瓶(6. 1. 12) 上 ,将充分振荡后的真菌孢子悬浮液过滤 , 除去菌丝和培养基碎片 。

　　将真菌孢子悬浮液用营养盐溶液(7. 3)稀释 ,用血球计数板(6. 1. 13)或其他方法测定真菌孢子浓度 ,并稀释使每毫升(mL)悬浮液中真菌孢子浓度为 0. 8×106 个 ~ 1. 2× 106 个 。制备好的每种真菌孢子悬浮液可在 4 ℃ ~ 10 ℃的菌种保存箱(6. 1. 10)中保存不超过 4 d,试验前将制备的每种真菌孢子悬浮液等体积混合 ,获得混合真菌孢子液 。

　　8.5 接种培养

　　8.5. 1 接种培养选择

　　接种培养分为耐真菌生长性评估的接种培养和耐真菌生长持久性评估的接种培养 ,可根据胶粘剂在不同使用环境下的耐真菌要求进行选择 。

　　5

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　　8.5.2 耐真菌生长性评估的接种培养

　　8.5.2. 1 培养皿法(A法)

　　8.5.2. 1. 1 方法描述

　　将试件置于表面已接种和涂布混合真菌孢子液的培养基上 ,模拟真菌生长环境下培养 。

　　8.5.2. 1.2 接种

　　向无菌培养皿(6. 1. 14) 中倒入约 20 mL 营养盐琼脂培养基(7. 4) , 当培养基凝固后 , 向每个培养基表面加入 0. 4 mL~0. 6 mL 的混合真菌孢子液(见 8. 4. 3)并使用无菌涂布棒(6. 1. 15)将其涂布均匀 ,再用尖头镊子(6. 1. 4)将 3个试件和 3个空白对照样品分别放置在 6块培养基表面中央 。

　　8.5.2. 1.3 培养

　　将已接种的试件和空白对照样品置于恒温恒湿培养箱(6. 1. 16) 中 ,在(28±1) ℃ 、相对湿度不低于90%的条件下培养 ,7 d后目视检查空白对照样品上真菌生长情况 。 3 个空白对照样品均应 有 真 菌 生长 ,否则试验无效 ,应重新进行试验 。若每个空白对照样品上均可见真菌生长 ,则继续培养试件和空白对照样品至第 28天后按第 9章进行评估 。

　　经有关方商定 ,可以延长培养时间 ,培养期间每 56 d应将试件从培养皿中取出重新按 8. 5. 2. 1. 2 和8. 5. 2. 1. 3操作 。培养结束后按第 9章进行评估 。接种和培养时间见表 3。

　　表 3 接种和培养时间

　　时间

　　第 1 天

　　第 1 天 ~第 56天

　　第 57天

　　第 57天 ~第 112天

　　第 113天

　　… … a

　　过程

　　接种

　　培养

　　重新接种

　　培养

　　重新接种

　　a 培养期间每 56 d应将样品从培养皿中取出重新接种培养 。

　　8.5.2.2 悬挂法(B法)

　　8.5.2.2. 1 方法描述

　　将真菌孢子液以喷洒方式均匀接种至试件 ,模拟真菌生长环境下培养 。

　　本方法适用于无法用培养皿法测试的大型试件或不规则试件 。

　　8.5.2.2.2 接种

　　把准备好的混合真菌孢子液(见 8. 4. 3) ,分别用灭菌喷雾器通过喷洒接种于 3个试件和 3 个空白对照样品的表面 。将已接种的试件和空白对照样品在室温下晾干 10 min~ 30 min,悬挂在可密封且能放置试件的玻璃或塑料容器内 。容器的大小与形状应使得其内部空间的底部具有足够敞露的水表面积 ,以保证放置的试件有足够的空间 ,不相互接触干扰 ,并保持容器内相对湿度不低于 90% 。悬挂好的试件应确保不被水触及或溅到 。

　　8.5.2.2.3 培养

　　将悬挂已接种试件和空白对照样品的容器放在恒温恒湿培养箱(6. 1. 16) 中 ,在(28±1) ℃ 、相对湿度不低于 90%的条件下培养 7 d后目视检查空白对照样品上的真菌生长情况 , 3 个空白对照样品均应有真菌生长 ,否则试验无效 ,应重新进行试验 。若每个空白对照样品上均可见真菌生长 ,则继续培养试

　　6

　　GB/T 46321—2025

　　件和空白对照样品至 28d后按第 9章进行评估 。经有关方商定 ,可以延长培养时间 ,培养期间每 56 d需对样品重新喷洒接种进行培养 。培养结束后按第 9章进行评估 。接种和培养时间见表 3。

　　8.5.3 耐真菌生长持久性评估的接种培养

　　8.5.3. 1 严酷环境条件选用

　　根据胶粘剂产品的实际使用环境条件 ,选用表 4 中的方法组合模拟严酷环境处理试件 。

　　表 4 严酷环境条件的模拟处理方法

　　步骤

　　方法 一 d

　　方法二 e

　　方法三f

　　方法四g

　　步骤 一a

　　紫外照射 100 h

　　—

　　—

　　紫外照射 100 h

　　步骤二b

　　—

　　50 ℃水浸泡 14 d,满 7 d 时

　　更换一次水

　　—

　　50 ℃水浸泡 3 d

　　步骤三 c

　　—

　　—

　　湿热循环 5 次

　　湿热循环 5 次

　　a 将 3个试件置于装有紫外灯的密闭箱体内 ,紫外灯应符合 GB/T 19258. 1 的规定 ,功率为 30W、波长为 253. 7 nm。将试件放置在距离紫外灯 0. 8 m~ 1. 0 m 处照射 ,照射面应为测试面 。

　　b 将 3个试件置于含有 1 L水的浸泡箱(6. 1. 19)中 ,试件应被水完全浸没 ,不应叠放 。将浸泡箱置于(50±2) ℃的电热鼓风干燥箱(6. 1. 17)或恒温水浴锅(6. 1. 18) 等 其 他 可 满 足 温 度 要 求 的 器 具 内 。不 同 试 样 制 备 的 试 件 应 置于不同浸泡箱(6. 1. 19)内 ,不应混放 。

　　c 将 3个试件放置在湿热试验箱(6. 1. 20) 中 ,设 置 温 度 循 环 条 件 为( -20±2) ℃下 20 h 和(85±2) ℃ 、相 对 湿 度85%下 4 h 为一个循环 。

　　d 模拟室外阳光照射环境 。

　　e 模拟接触水环境 。

　　f 模拟温度变化环境 。

　　g 模拟包含前 3 种条件的严酷环境 。

　　8.5.3.2 试件检查

　　检查按表 4方法处理后的试件 ,如试件发生断裂或表面有裂痕等情况 ,则试验失败 。

　　8.5.3.3 杀菌处理按 8. 2进行 。

　　8.5.3.4 接种培养

　　将按 8. 5. 3. 3处理后的试件按 8. 5. 2进行试验 。

　　9 结果评估

　　9. 1 评估方法

　　9. 1. 1 方法类别

　　结果评估采用目视检查方法和图像识别方法 。

　　7

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　　9. 1.2 目视检查方法

　　真菌接种培养结束后 ,将培养皿从恒温恒湿培养箱(6. 1. 16)取出 ,在生物安全柜(6. 1. 7)中 目视观察3个平行试件上表面的真菌生长情况及面积占比 。如需仲裁 ,应进行双倍试件测试 。

　　9. 1.3 图像识别方法

　　按附录 A 的规定进行 。

　　9.2 等级评估

　　耐真菌生长性和耐真菌生长持久性按表 5进行等级评估 。

　　若试件上真菌生长面积占比小于 10% ,应用显微镜(6. 1. 21)放大 50倍观察 。试件边缘 2 mm 内的真菌生长不应被计算在内 。结果以至少 2块试件的等级一致为准 。2 个平行试件的等级相差 2 个及以上时应重新进行试验 。

　　表 5 耐真菌生长性/耐真菌生长持久性等级评估准则

　　真菌的生长情况

　　真菌面积占比

　　耐真菌生长性/耐真菌生长持久性

　　不生长

　　0

　　0

　　痕量生长

　　<10%

　　1 级

　　少量生长

　　≥10% ,且<30%

　　2 级

　　中度生长

　　≥30% ,且<60%

　　3 级

　　重度生长

　　≥60%

　　4级

　　10 试验报告

　　试验报告应包括以下内容 :

　　a) 本文件编号 ;

　　b) 样品名称 、分类 、颜色 、生产日期 、配比(如有) ;

　　c) 试验日期 ;

　　d) 菌种名称 、菌株号 ;

　　e) 制样方式 、基材种类(如有) 、养护时间 ;

　　f) 试件的尺寸 ;

　　g) 接种培养方法(培养皿法 、悬挂法) ;

　　h) 试件培养条件(温度 、相对湿度和时间) ;

　　i) 耐真菌生长持久性模拟的环境影响条件(如有) ;

　　j) 结果评估(目视检查方法 、图像识别方法) ;

　　k) 显微镜放大倍数(如有) ;

　　l) 测试前后试件照片 ;

　　m) 耐真菌生长性评估等级 ;

　　n) 耐真菌生长持久性评估等级(如有) ;

　　o) 与规定的试验方法的任何不同之处 。

　　8

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　　附 录 A (规范性)

　　图像识别方法

　　A. 1 基本原理

　　通过图像识别及算法处理等技术 ,对试件表面真菌生长情况计算面积占比后进行等级评估 。

　　A.2 试验设备

　　A.2. 1 基本结构

　　真菌生长面积图像识别设备的基本结构如图 A. 1 所示 , 由图像采集设备 、图像处理及分析软件及辅助设施组成 ,应能进行图像采集 、图像预处理 、图像识别 、面积计算等 。

　　标引序号说明 :

　　1— 试件 ;

　　2— 支架 ;

　　3— 图像采集设备 ;

　　4— 箱体 ;

　　5— 带有图像识别软件的计算机外部设备 。

　　图 A. 1 真菌生长面积图像识别设备示意图

　　A.2.2 精确性要求

　　图像识别方法与目视检查方法判定结果差异不应超过 1个级别 。

　　A.3 试验过程

　　A.3. 1 开启电源 ,预热至稳定 。

　　A.3.2 使用仪器对每个试件培养开始前和培养结束后的图像分别进行采集 。

　　A.3.3 将同一试件培养前图像作为空白扣除 ,对培养后试件表面真菌生长面积百分比进行自动计算 ,读数精确至 1% 。

　　9

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　　附 录 B (资料性)培养基制备

　　B. 1 营养盐溶液

　　B. 1. 1 配方

　　营养盐溶液的配方见表 B. 1。

　　表 B. 1 营养盐溶液

　　单位为克

　　试剂名称

　　添加量

　　硝酸钠(NaNO3 )

　　2. 0

　　磷酸二氢钾(KH2PO4 )

　　0. 70

　　磷酸氢二钾(K2 HPO4 )

　　0. 30

　　氯化钾(KCl)

　　0. 25

　　硫酸镁(MgSO4 · 7H2 O)

　　0. 50

　　硫酸亚铁(FeSO4 · 7H2 O)

　　0. 002

　　蔗糖(C12 H22 O11)

　　5. 0

　　B. 1.2 未灭菌营养盐溶液制备方法

　　用电子天平(6. 1. 22)称取表 B. 1 中各成分于烧杯中 ,先加适量的水加热溶解后 ,继续加去离子水至1 000 mL,逐滴加入 0. 1 mol/L的氢氧化钠溶液和 0. 1 mol/L盐酸 ,用 pH计(6. 1. 23)测量 ,调节 pH 值至 6. 0~ 6. 5。

　　B. 1.3 无菌营养盐溶液制备方法

　　将按 B. 1. 2制备的未灭菌的营养盐溶液放入高压蒸汽灭菌锅(6. 1. 2) , 以(121±2) ℃灭菌 20 min后冷却 。

　　B.2 营养盐琼脂培养基

　　用电子天平(6. 1. 22)称取 20. 0 g琼脂加入按 B. 1. 2制备的 1 000 mL未灭菌营养盐溶液中 ,加热溶解后 ,逐滴加入 0. 1 mol/L的氢氧 化 钠 溶 液 和 0. 1 mol/L盐 酸 , 用 pH 计(6. 1. 23) 测 量 , 调 节 pH 值 至6. 0~ 6. 5,用高压蒸汽灭菌锅(6. 1. 2)以(121±2) ℃灭菌 20min。 向无菌培养皿(6. 1. 14)中注入灭菌后的培养基 ,凝固后备用 ,也可用商品培养基 ,按其产品说明书要求制备 。

　　B.3 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA)

　　B.3. 1 配方

　　马铃薯-葡萄糖琼脂培养基的配方见表 B. 2。

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　　GB/T 46321—2025

　　表 B.2 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基

　　试剂名称

　　添加量

　　马铃薯(去皮)

　　300. 0 g

　　葡萄糖

　　20. 0 g

　　琼脂

　　20. 0 g

　　水

　　1 000 mL

　　B.3.2 制备方法

　　称取去皮切片后的新鲜无霉烂的马铃薯 300. 0 g 于烧杯中 ,加入 600mL去离子水煮沸 。20min后用双层纱布提取滤液 。在滤液中加入表 B. 2 中的葡萄糖和琼脂 ,加入去离子水至 1 000 mL,加热溶解 。用 pH计(6. 1. 23)测量酸碱度 ,逐滴加入 0. 1 mol/L的氢氧化钠溶液和 0. 1 mol/L盐酸 ,调节 pH 值至6. 0~ 6. 5。也可用商品马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA) 依产品说明书要求制备 。按 10 mL每支分装于无色玻璃试管(6. 1. 1)内 ,用高压蒸汽灭菌锅(6. 1. 2)以(121±2) ℃灭菌 20 min,趁热取出试管并以与桌面低夹角倾斜摆放 ,待上液面在管内 自然冷却凝固成斜面后备用 。

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　　GB/T 46321—2025

　　参 考 文 献

　　[1] GB/T 12728—2006 食用菌术语

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