T/TBD 005-2024 微生物肥料中活菌的快速检测细则

ICS 65.080
CCS B10
团体标准
T/TBD 005—2024
微生物肥料中活菌的快速检测细则
Guidelines for Rapid Detection of Live Bacteria in Microbial Fertilizers
2024-12-13 发布2024-12-15 实施
保定市肥料协会发布

本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起
草。
本文件由保定多微质检技术服务有限公司提出。
本文件由保定市肥料协会归口。
本文件起草单位：保定多微质检技术服务有限公司、保定市肥料协会、保定市土壤肥料工作站、保
定市清苑区农业技术推广中心、河北民得富生物技术有限公司、绿尧河北生物科技有限公司、保定玖瑞
农业科技有限公司、河北浩塑环保科技有限公司。
本文件主要起草人：谭栓女、段晨光、焦翠丽、常立鹏、赵香莲、李学会、景玉蓉、曹宇。
本文件为首次发布。
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肥料中活菌的快速检测细则
1 范围
本文件规定了肥料中微生物菌的快速检测细则。
本文件适用于快速检测肥料中微生物菌微生物肥料中的有效活菌。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 19489 实验室生物安全通用要求
NY/T 2321 微生物肥料产品检验规程
NY/T 1113 微生物肥料术语
NY/T 1736-2009 微生物肥料菌种鉴定技术规范
3 术语和定义
NY/T 1113 界定的术语和定义适用于本文件。
4 检测方法
4.1 原料存放区应防雨、防水、防火、防渗透。
4.2 处理场地应配备防雨、防渗和排水设施。
4.3 成品存贮区应干燥、通风、防晒、防破裂、防雨淋。
4 检测方法
4.1 样品处理
称取样品10g(精确到0.01g),加入到带玻璃珠的100mL无菌水（或生理盐水）中[液体样品取10.0mL加
入90mL无菌水（或生理盐水）中]，静置20min，在旋转式摇床上200r/min充分震荡30min，即成母液菌悬
液（基础液）。
4.2 血球计数
4.2.1 将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。
4.2.2 将母液菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，
稍待片刻，使微生物菌全部沉降到血球计数室内。
4.2.3 计数时，如果使用16格×25格规格的计数室，要按对角线位，取左上、右上、左下、右下4个中格
（即100个小格）的微生物菌数。如果规格为25格×16格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需要再数
中央的一个中格（即80个小方格）的微生物菌数。
4.2.4 当遇到位于大格线上的微生物菌，一般只计数大方格的上方和右方线上的菌的个体（或只计数下方
和左方线上的菌的个体）。
4.2.5 对每个样品计数三次，取其平均值，按其公式计算每1mL菌液中所含的微生物菌个体数。
4.3 镜检
将待检样本制成涂片，染色后观察微生物的形态、大小、排列方式等特征，结合已知知识，初步判断
菌的种类。
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4.4 平板计数
4.4.1 根据血球计数结果与镜检结果，推算出平板计数的稀释梯度与适宜的培养基种类。
4.4.2 平板计数按照NY/T 2321 的规定执行。