分子克隆实验指南 第三版 上册

分子克隆实验指南 第三版 上册
作　者： （美）J.萨姆布鲁克（Joseph Sambrook），（美）D.W.拉塞尔（David W.Russell）著
出版时间：2002
内容简介
　　《分子克隆实验指南（第3版）（套装上下册）》的前两版以其无可匹敌的声誉，在近20年的时间里一直被作为分子生物学实验的经典参考书。在第三版中，作者对图书内容进行了完全的升级，修订了实验的每条方案，增加了大量新的材料，拓宽了它涉及的领域，内容丰富而详细，使其具有用于学习遗传学、分子细胞生物学、发育生物学、微生物学、神经科学和免疫学等科学的重要指导和参考价值。《分子克隆实验指南（第3版）（套装上下册）》具有先进性、实用性、权威性的特点，是生命科学实验室内当之无愧的“圣经”。
目录
中译本序
译者的话
第三版前言
上册
第1章 质粒及其在分子克隆中的应用
导言
SDS碱裂解法制备质粒DNA（方案1～3）
方案1 SDS碱裂解法制备质粒DNA：小量制备
方案2 SDS碱裂解法制备质粒DNA：中量制备
方案3 SDS碱裂解法制备质粒DNA：大量制备
煮沸裂解法制备质粒DNA（方案4和5）
方案4 煮沸裂解法小量制备质粒DNA
方案5 煮沸裂解法大量制备质粒DNA
方案6 牙签法小量制备质粒DNA
方案7 SDS裂解法提取质粒DNA
方案8 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA
方案9 层析法纯化质粒DNA
方案10 氯化铯一溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA：连续梯度法
方案11 氯化铯一溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA：不连续梯度法
方案12 用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭
方案13 用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭
方案14 NaCl离心法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸
方案15 SephacrylS-1000层析法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸
方案16 氯化锂沉淀法去除质粒：DNA制备物中的小片段核酸
方案17 在质粒载体中进行定向克隆
方案18 在凸出末端上连接接头
方案19 在质粒载体中进行平末端片段的克隆
方案20 质粒DNA的去磷酸化
方案21 向平末端DNA连接合成接头
方案22 在低熔点琼脂糖中连接质粒和目的DNA
方案23 制备和转化感受态大肠杆菌的IIanahan方法：高效的转化策略
方案24 制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法：制备超级感受态细胞
方案25 用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌
方案26 大肠杆菌的电击转化
方案27 用X-gal和IPTG筛选细菌菌落：a互补
替代方案：X-gal和IPTG直接用于琼脂板
方案28 小量细菌克隆的杂交法筛选
方案29 中等量细胞克隆的杂交法筛选
替代方案：菌落的快速裂解和DNA固定于尼龙膜
方案30 大量细菌克隆的杂交方法筛选
方案31 菌落的裂解和DNA与滤膜的结合
方案32 在滤膜上进行细菌DNA的杂交
信息栏
氯霉素
卡那霉素
pBR322
四环素
氨苄青霉素和羧苄青霉素
X-gal
a互补
溴化乙锭
缩合剂与聚合剂
聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA
溶菌酶
聚乙二醇
氯化铯和氯化铯平衡密度梯度
DNA连接酶
接头
电击转化
第2章 九噬菌体及其载体
导言
方案1 入噬菌体的铺平板培养
附加方案：表达B-半乳糖苷酶噬菌体的噬菌斑分析
附加方案：大噬菌斑
方案2 入噬菌体噬菌斑的挑取
方案3 通过平板裂解和洗脱制备入噬菌体原种
替代方案：通过平板裂解和刮取制备入噬菌体原种
方案4 用小量液体培养物制备入噬菌体原种
方案5 入噬菌体的大规模培养：低倍数感染
替代方案：入噬菌体的大规模培养：高倍数感染
方案6 从大规模裂解物中制备入噬菌体颗粒
方案7 通过凝胶电泳测定入噬菌体原种和裂解物中DNA的含量
方案8 通过CsCl等密度梯度离心纯化入噬菌体颗粒
替代方案：通过CsCl平衡梯度等密度离心纯化入噬菌体颗粒
方案9 通过甘油分级梯度离心纯化入噬菌体颗粒
方案10 通过沉淀／离心纯化入噬菌体颗粒
方案11 用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取入噬菌体DNA
方案12 用甲酰胺从大规模培养物中提取入噬菌体DNA
方案13 可被单一限制酶切割用作克隆载体的入噬菌体DNA的制备
方案14 经双限制酶切割用作克隆载体的入噬菌体DNA的制备
方案15 入噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理
方案16 入噬菌体臂的纯化：通过蔗糖密度梯度离心
方案17 用于基因组文库中的真核DNA的部分酶切：预反应
方案18 用于基因组文库的真核DNA的部分酶切：制备反应
方案19 入噬菌体臂与外源基因组DNA片段的连接
方案20 基因组文库的扩增
方案21 噬菌体DNA从噬菌斑到膜的转移
替代方案：从噬菌斑到滤膜的快速转移
方案22 噬菌体DNA在滤膜上的杂交
方案23 入噬菌体分离物的快速分析：从平板裂解物中纯化kDNA
附加方案：通过CTAB沉淀除去多糖
方案24 入噬菌体分离物的快速分析：从液体培养物中纯化kDNA
信息栏
噬菌体：历史回顾
将对DNA大分子的损伤减少到最低程度
体外包装
第3章 M13噬菌体载体
导言
方案1 M13噬菌体铺平板
方案2 M13噬菌体液体培养
方案3 M13噬菌体双链（复制型）DNA的制备
方案4 M13噬菌体单链DNA的制备
方案5 单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
方案6 M13噬菌体载体的克隆
方案7 重组M13噬菌体克隆分析
替代方案：杂交法筛选M13噬菌体噬菌斑
方案8 用噬菌粒载体制备单链DNA
信息栏
生长时间
聚乙二醇
第4章 高容量载体的应用
导言
方案1 应用黏粒载体构建基因组DNA文库
方案2 通过杂交筛选未扩增的黏粒文库：滤膜影印
附加方案：减少交叉杂交
方案3 黏粒文库的扩增和贮存：在液体培养基内扩增
方案4 黏粒文库的扩增和贮存：在滤膜上扩增
替代方案：在平板上扩增
方案5 P1噬菌体及其克隆系统的应用
附加方案：用点滴透析法纯化高分子质量DNA
替代方案：用Qiagen树脂层析纯化高分子质量环状DNA
方案6 P1噬菌体克隆在大肠杆菌宿主间的转移
方案7 细菌人工染色体的应用
方案8 从小量培养物中分离BACDNA
方案9 从大量培养物中分离BACDNA
方案10 酵母人工染色体的应用
方案11 酿酒酵母的生长及其DNA的制备
方案12 酵母DNA的小量制备
方案13 利用：PCR分析酵母菌落
方案14 高容量载体中基因组DNA片段末端的分离：小载体PCR
信息栏
Cre-lazP
大片段克隆产品及其服务
第5章 DNA凝胶电泳和脉冲场琼脂糖凝胶电泳
导言
方案1 琼脂糖凝胶电泳
方案2 琼脂糖凝胶中DNA的检测
方案3 琼脂糖凝胶中DNA的回收：DEAE-纤维素膜电泳
方案4 琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中DNA的回收：电洗脱至透析袋
方案5 阴离子交换色谱纯化从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶回收的DNA
方案6 低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收：有机溶剂抽提
替代方案：用玻璃珠从琼脂糖凝胶中回收DNA
方案7 低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收：用琼脂糖酶消化
方案8 碱性琼脂糖凝胶电泳
附加方案：碱性琼脂糖凝胶的放射自显影
……
第6章 真核基因组DNA的制备和分析
第7章 真核细胞mRNA的提取、纯化和分析
第8章 聚合酶链式反应体外扩增DNA
第9章 放射性标记DNA探针与RNA探针的制备
第10章 合成寡核苷酸探针
第11章 cDNA文库制备及其基因鉴定