分子生物学技术在中医药研究中的应用 第三版 方肇勤主编 2018年版

分子生物学技术在中医药研究中的应用 第三版
作者：方肇勤主编
出版时间：2018年版
内容简介
　　本教材从实用性和新颖性角度出发，介绍了若干目前国内外应用较多的先进技术，以及一些常用的分子生物学技术及其在中医药研究中的应用。主要包括绪论、分子生物学常用基本技术、DNA的研究方法、RNA的研究方法、蛋白质的研究方法、基因功能与表达调控的研究方法、分子生物学技术中常用的细胞生物学技术、分子生物学技术常用网络资源及利用8部分内容。
目录
第一章绪论001



第一节分子生物学技术在中医药防治肝癌作用机制探索中的应用001

第二节分子生物学技术在中医药研究中的应用现状007

第三节中医药研究中常用的分子生物学技术013

第四节分子生物学技术在中医药研发中的应用前景020


第二章分子生物学常用基本技术026



实验1重组质粒026

实验2质粒转化大肠杆菌030

实验3阳性单菌落扩增与小量DNA制备034

实验4酶切重组质粒和电泳分离所插入的DNA037

实验5从凝胶中回收DNA040

实验6大量质粒DNA制备041


第三章DNA的研究方法045



实验7哺乳类动物组织基因组DNA的提取045

实验8基因组文库的建立与目的基因筛选048

实验9Southern blot058

实验10PCR064

实验11DNA双脱氧链终止法测序070


第四章RNA的研究方法077



实验12哺乳类动物组织总RNA的提取079

实验13mRNA的分离081

实验14Northern blot084

实验15RTqPCR090

实验16多基因表达的检测096

实验17cDNA库建立112

实验18基因全序列cDNA库筛选123


第五章蛋白质的研究方法132



实验19哺乳类动物组织蛋白质的提取132

实验20Western blot136

实验21ELISA149

实验22免疫组织化学154

实验23蛋白质双向电泳160

实验24蛋白芯片178


第六章基因功能与表达调控的研究方法182



实验25RNAi183

实验26报告基因与基因调控元件的检测189

实验27体外定点诱变技术192

实验28CRISPRCas9基因编辑技术195

实验29基因过表达204

实验30免疫共沉淀211


第七章分子生物学实验常用的细胞生物学技术216



实验31哺乳类动物细胞的培养216

实验32细胞增殖检测224

实验33流式细胞术226

实验34体外细胞划痕实验234

实验35细胞迁移和侵袭实验236

实验36TUNEL法检测细胞凋亡239


第八章分子生物学常用网络资源及利用243



第一节美国国家生物技术信息中心（NCBI）243

第二节GenBank数据库查询与搜索248

第三节BLAST255

第四节EST的电子延伸265

第五节cDNA序列的蛋白阅读框架分析、染色体定位及其在机体各组织中的表达
预测271

第六节PCR引物或序列寡核苷酸探针的在线设计278

第七节蛋白质分析280


附录287



1分子生物学实验常用仪器设备287

2常用生物学数据288

3常用载体292

4分子克隆常用酶293

5常用储存液的配制297

6常用液体培养基299

7常用缓冲液300

8常用酸碱溶液的浓度与分子量300

9不同浓度酸碱液的pH301

10核酸的纯化（用酚氯仿抽提）301

11核酸浓缩302

12分光光度法测定DNA及RNA含量303

13Sephadex 的水化303

14放射性度量单位和数据303

15科学单位303

16离心速度和离心力换算304

17常用分子生物学术语对照304