分子克隆实验指南 第三版 上册作 者: (美)J.萨姆布鲁克(Joseph Sambrook),(美)D.W.拉塞尔(David W.Russell)著出版时间:2002内容简介 《分子克隆实验指南(第3版)(套装上下册)》的前两版以其无可匹敌的声誉,在近20年的时间里一直被作为分子生物学实验的经典参考书。在第三版中,作者对图书内容进行了完全的升级,修订了实验的每条方案,增加了大量新的材料,拓宽了它涉及的领域,内容丰富而详细,使其具有用于学习遗传学、分子细胞生物学、发育生物学、微生物学、神经科学和免疫学等科学的重要指导和参考价值。《分子克隆实验指南(第3版)(套装上下册)》具有先进性、实用性、权威性的特点,是生命科学实验室内当之无愧的“圣经”。目录中译本序译者的话第三版前言上册第1章 质粒及其在分子克隆中的应用导言SDS碱裂解法制备质粒DNA(方案1~3)方案1 SDS碱裂解法制备质粒DNA:小量制备方案2 SDS碱裂解法制备质粒DNA:中量制备方案3 SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备煮沸裂解法制备质粒DNA(方案4和5)方案4 煮沸裂解法小量制备质粒DNA方案5 煮沸裂解法大量制备质粒DNA方案6 牙签法小量制备质粒DNA方案7 SDS裂解法提取质粒DNA方案8 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA方案9 层析法纯化质粒DNA方案10 氯化铯一溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:连续梯度法方案11 氯化铯一溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:不连续梯度法方案12 用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭方案13 用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭方案14 NaCl离心法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸方案15 SephacrylS-1000层析法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸方案16 氯化锂沉淀法去除质粒:DNA制备物中的小片段核酸方案17 在质粒载体中进行定向克隆方案18 在凸出末端上连接接头方案19 在质粒载体中进行平末端片段的克隆方案20 质粒DNA的去磷酸化方案21 向平末端DNA连接合成接头方案22 在低熔点琼脂糖中连接质粒和目的DNA方案23 制备和转化感受态大肠杆菌的IIanahan方法:高效的转化策略方案24 制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法:制备超级感受态细胞方案25 用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌方案26 大肠杆菌的电击转化方案27 用X-gal和IPTG筛选细菌菌落:a互补替代方案:X-gal和IPTG直接用于琼脂板方案28 小量细菌克隆的杂交法筛选方案29 中等量细胞克隆的杂交法筛选替代方案:菌落的快速裂解和DNA固定于尼龙膜方案30 大量细菌克隆的杂交方法筛选方案31 菌落的裂解和DNA与滤膜的结合方案32 在滤膜上进行细菌DNA的杂交信息栏氯霉素卡那霉素pBR322四环素氨苄青霉素和羧苄青霉素X-gala互补溴化乙锭缩合剂与聚合剂聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA溶菌酶聚乙二醇氯化铯和氯化铯平衡密度梯度DNA连接酶接头电击转化第2章 九噬菌体及其载体导言方案1 入噬菌体的铺平板培养附加方案:表达B-半乳糖苷酶噬菌体的噬菌斑分析附加方案:大噬菌斑方案2 入噬菌体噬菌斑的挑取方案3 通过平板裂解和洗脱制备入噬菌体原种替代方案:通过平板裂解和刮取制备入噬菌体原种方案4 用小量液体培养物制备入噬菌体原种方案5 入噬菌体的大规模培养:低倍数感染替代方案:入噬菌体的大规模培养:高倍数感染方案6 从大规模裂解物中制备入噬菌体颗粒方案7 通过凝胶电泳测定入噬菌体原种和裂解物中DNA的含量方案8 通过CsCl等密度梯度离心纯化入噬菌体颗粒替代方案:通过CsCl平衡梯度等密度离心纯化入噬菌体颗粒方案9 通过甘油分级梯度离心纯化入噬菌体颗粒方案10 通过沉淀/离心纯化入噬菌体颗粒方案11 用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取入噬菌体DNA方案12 用甲酰胺从大规模培养物中提取入噬菌体DNA方案13 可被单一限制酶切割用作克隆载体的入噬菌体DNA的制备方案14 经双限制酶切割用作克隆载体的入噬菌体DNA的制备方案15 入噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理方案16 入噬菌体臂的纯化:通过蔗糖密度梯度离心方案17 用于基因组文库中的真核DNA的部分酶切:预反应方案18 用于基因组文库的真核DNA的部分酶切:制备反应方案19 入噬菌体臂与外源基因组DNA片段的连接方案20 基因组文库的扩增方案21 噬菌体DNA从噬菌斑到膜的转移替代方案:从噬菌斑到滤膜的快速转移方案22 噬菌体DNA在滤膜上的杂交方案23 入噬菌体分离物的快速分析:从平板裂解物中纯化kDNA附加方案:通过CTAB沉淀除去多糖方案24 入噬菌体分离物的快速分析:从液体培养物中纯化kDNA信息栏噬菌体:历史回顾将对DNA大分子的损伤减少到最低程度体外包装第3章 M13噬菌体载体导言方案1 M13噬菌体铺平板方案2 M13噬菌体液体培养方案3 M13噬菌体双链(复制型)DNA的制备方案4 M13噬菌体单链DNA的制备方案5 单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备方案6 M13噬菌体载体的克隆方案7 重组M13噬菌体克隆分析替代方案:杂交法筛选M13噬菌体噬菌斑方案8 用噬菌粒载体制备单链DNA信息栏生长时间聚乙二醇第4章 高容量载体的应用导言方案1 应用黏粒载体构建基因组DNA文库方案2 通过杂交筛选未扩增的黏粒文库:滤膜影印附加方案:减少交叉杂交方案3 黏粒文库的扩增和贮存:在液体培养基内扩增方案4 黏粒文库的扩增和贮存:在滤膜上扩增替代方案:在平板上扩增方案5 P1噬菌体及其克隆系统的应用附加方案:用点滴透析法纯化高分子质量DNA替代方案:用Qiagen树脂层析纯化高分子质量环状DNA方案6 P1噬菌体克隆在大肠杆菌宿主间的转移方案7 细菌人工染色体的应用方案8 从小量培养物中分离BACDNA方案9 从大量培养物中分离BACDNA方案10 酵母人工染色体的应用方案11 酿酒酵母的生长及其DNA的制备方案12 酵母DNA的小量制备方案13 利用:PCR分析酵母菌落方案14 高容量载体中基因组DNA片段末端的分离:小载体PCR信息栏Cre-lazP大片段克隆产品及其服务第5章 DNA凝胶电泳和脉冲场琼脂糖凝胶电泳导言方案1 琼脂糖凝胶电泳方案2 琼脂糖凝胶中DNA的检测方案3 琼脂糖凝胶中DNA的回收:DEAE-纤维素膜电泳方案4 琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中DNA的回收:电洗脱至透析袋方案5 阴离子交换色谱纯化从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶回收的DNA方案6 低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收:有机溶剂抽提替代方案:用玻璃珠从琼脂糖凝胶中回收DNA方案7 低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收:用琼脂糖酶消化方案8 碱性琼脂糖凝胶电泳附加方案:碱性琼脂糖凝胶的放射自显影……第6章 真核基因组DNA的制备和分析第7章 真核细胞mRNA的提取、纯化和分析第8章 聚合酶链式反应体外扩增DNA第9章 放射性标记DNA探针与RNA探针的制备第10章 合成寡核苷酸探针第11章 cDNA文库制备及其基因鉴定 上一篇: 黄帝内经饮食养生 下一篇: 恶性肿瘤TNM分期速查手册