苏云金芽孢杆菌Cry1类毒素免疫广谱检测技术研究 作者:焦凌霞,刘媛,刘贝贝 著 出版时间:2018年版内容简介 采用正负筛选方法,成功获得6株具有Cry1Ab毒素蛋白结合活性的阳性噬菌体单域抗体菌株,利用基因工程抗体易于定向修饰及Cry毒素具有相似结构的特点,以Cry1Ab毒素单域抗体基因为材料,通过同源建模及分子对接技术分析了Cry1Ab抗体与5种Cry1类毒素的关键氨基酸结合位点,以关键结合位点及其邻近位点为目标,利用SPDBV软件进行虚拟协同突变,预测亲和力及广谱性都有所提高的突变抗体,并通过定点饱和突变技术定向改造母本抗体构建突变抗体库;克隆表达了Cry1类毒素共性结构域,并利用共性结构域蛋白包被和多种Cry1类毒素交替包被筛选策略,获取了5个检测对象可覆盖多种Cry1类毒素的广谱抗体,比较分析突变抗体和母本抗体的亲和力及广谱性,探索广谱抗体识别区的分子结构特性,为建立高灵敏度多种BtCry毒素的免疫筛查方法和开发Cry毒素高效检测技术奠定基础。目录前言第一章 绪论一、Cry毒素的分类和命名二、苏云金芽孢杆菌Cry毒素的结构与功能三、苏云金芽孢杆菌制剂及其转基因产品存在的风险四、苏云金芽孢杆菌Cry毒素检测技术(一)生物测定法(二)PCR扩增检测法(三)分子杂交技术(四)免疫学检测方法五、抗体的发展六、噬菌体抗体库技术七、抗体基因的体外高频突变技术第二章 人源化抗苏云金芽孢杆菌Cry1Ab毒素单域抗体的筛选及活性鉴定一、材料与方法(一)材料与试剂(二)方法二、结果与分析(一)特异性重组噬菌体单域抗体的富集(二)单克隆ELISA方法筛选阳性重组噬菌体(三)菌液PCR结果(四)噬菌体单域抗体的氨基酸序列比对三、讨论四、结论……第三章 同源建模结合点突变技术构建单域抗体定点饱和突变库第四章 苏云金芽孢杆菌(Bt)Cry1类毒素共性结构域的分析定位第五章 苏云金芽孢杆菌(Bt)Cry1类毒素共性结构域的原核表达、纯化及鉴定第六章 Cry1类毒素的广谱抗体筛选、鉴定及广谱特异性分析参考文献附录缩写符号说明后记 上一篇: 热带农业科学一流学科丛书 中国神秘野果 马槟榔 下一篇: 畜禽高效健康养殖关键技术丛书 高效健康养鹿关键技术 赵世臻,宋百军,张秀莲 编著 2010年版