GB/T 28643-2012 饲料中二噁英及二噁英类多氯联苯的测定 同位素稀释-高分辨气相色谱+高分辨质谱法

　　ICS 65. 120 B 46

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 28643—2012

　　饲料中二噁英及二噁英类多氯联苯的测定

　　同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨

　　质谱法

　　Determination ofPCDD/Fsanddioxin-likePCBsin feeds—

　　Isotopedilution HRGC/HRMS

　　2012-07-31发布 2012-11-01实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 28643—2012

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　本标准主要参考了美国环境规划署(USEPA)颁布的 1613B (Tetra-through octa-chlorinated diox- insand furans by isotope dilution HRGC/HRMS, 1997) 和 1668A(Chlorinated biphenyl congenersin water, soil, sediment, and tissue by HRGC/HRMS,1999)方法 , 以及《欧盟关于饲料的分类及其中二噁英和二噁英类多氯联苯的限量标准》(Directive2002/32/EC,lastamended in3 February2006)文件 。油脂类样品中二噁英和二噁英类多氯联苯的测定参考 GB/T 5009. 205—2007《食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定》。

　　本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归 口 。

　　本标准起草单位 : 中国科学院生态环境研究中心 、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心(北京)] 、国家环境分析测试中心 、中国科学院大连化学物理研究所 。

　　本标准主要起草人 :张庆华 、杨曙明 、刘爱民 、倪余文 、王璞 、李兰 、贾铮 、李英明 。

　　Ⅰ

　　GB/T 28643—2012

　　饲料中二噁英及二噁英类多氯联苯的测定

　　同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨

　　质谱法

　　1 范围

　　本标准规定了用同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨质谱法测定饲料中 17种 2, 3, 7, 8-氯取代的多氯代二苯并二噁英(PCDDs)和多氯代二苯并呋喃(PCDFs)(以下简称 PCDD/Fs)以及 12种二噁英类多氯联苯(DL-PCBs)(见表 A. 1 和表 A. 2)的方法 。

　　本标准适用于饲料原料 、配合饲料 、浓缩饲料 、精料补充料 、添加剂预混合饲料以及饲料添加剂 。

　　本标准方法分析饲料中 PCDD/Fs和 DL-PCBs的检测限见表 B. 1。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注 日期的引用文件 ,仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 。

　　GB/T 5009. 205—2007食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定

　　GB/T 14699. 1 饲料 采样

　　GB/T 20195 动物饲料 试样的制备

　　3 原理

　　应用加速溶剂提取和索氏提取等技术提取样品中的 PCDD/Fs和 DL-PCBs,提取液经过复合硅胶柱 、碱性氧化铝柱等填装色谱柱净化 、浓缩后 ,用高分辨气相色谱/高分辨质谱进行分析检测 , 同位素稀释法定量 ;根据各目标化合物的毒性当量因子(TEF) 与所测得含量相乘后累加 ,计算样品中 PCDD/Fs和 DL-PCBs的毒性当量(TEQ) 。

　　4 试剂和材料

　　除非另 有 规 定 , 在 分 析 中 均 使 用 农 残 级(pesticide residue) 试 剂 和 符 合 GB/T 6682规 定 的 一 级用水 。

　　4. 1 正己烷 。

　　4. 2 二氯甲烷 。

　　4. 3 甲苯 。

　　4. 4 壬烷 。

　　4. 5 浓硫酸(优级纯) 。

　　4. 6 氢氧化钠(优级纯) 。

　　1

　　GB/T 28643—2012

　　4. 7 标准溶液 。

　　4. 7. 1 PCDD/Fs同位 素 标 记 定 量 内 标 标 准 溶 液 : PCDD/Fs的 同 位 素 标 记 定 量 内 标 溶 液 浓 度 见 表C. 1,分析测试中可直接使用 ,无需稀释 。

　　4. 7. 2 PCDD/Fs同 位 素 标 记 的 回 收 率 内 标 标 准 溶 液 : PCDD/Fs的 同 位 素 标 记 回 收 率 内 标 溶 液(13C-1,2,3,4-TCDD 和13C-1,2,3,7,8,9-HxCDD)浓度见表 C. 2,分析测试中可直接使用 。

　　4. 7. 3 PCDD/Fs精 密 度 和 回 收 率 检 查 标 准 溶 液(PAR) : 用 壬 烷 配 制 的 含 天 然 PCDD/Fs溶 液(见表 C. 3) , 用于检测过程中精密度和回收率试验(OPR) 。

　　4. 7. 4 PCDD/Fs校正标准溶液 :为含有天然和同位素标记的 PCDD/Fs系列校正溶液(见表 C. 4) 。测定校正标准溶液 ,可以获得天然与同位素标记 PCDD/Fs的相对响应因子(RRF) 。 CS3可用于已建立RRF 的 日常校正和校正曲线校验;CS1可用于检查 HRGC/HRMS应具备的灵敏度 。

　　4. 7. 5 DL-PCBs同位素标记定量内标标准溶液 :DL-PCBs的同位素标记定量内标溶液浓度见表 C. 5。分析测试中应稀释后使用 。

　　4. 7. 6 DL-PCBs同位素标记的回收率内标标准溶液 :DL-PCBs的同位素标记回收率内标溶液浓度见表 C. 6。分析测试中应稀释后使用 。

　　4. 7. 7 DL-PCBs精 密 度 和 回 收 率 检 查 标 准 溶 液 (PAR) : 用 壬 烷 配 制 的 含 天 然 DL-PCBs溶 液 (见表 C. 7) ,用于检测过程中精密度和回收率试验(OPR) 。

　　4. 7. 8 DL-PCBs校正标准溶液 :为含有天然和同位素标记的 DL-PCBs系列校正溶液(见表 C. 8) 。其中CS3可用于已建立 RRF的日常校正和校正曲线校验 ,CS1可用于检查 HRGC/HRMS应具备的灵敏度 。

　　4. 8 硅胶 。

　　4. 8. 1 活性硅胶 :使用前在 550 ℃下活化 12 h,于干燥器中密封保存 ,1个月内使用 。

　　4. 8. 2 酸性硅胶(质量分数为 40%) :称取 60 g 活性硅胶(4. 8. 1)于烧瓶中 ,用滴管逐滴加入 40 g 浓硫酸(4. 5)并不断摇动使其较均匀混合 ,再将烧瓶加塞后固定于摇床上进行振荡 ,直至硅胶呈均匀流动状态 ,密封保存于干燥器中 ,1个月内使用 。

　　4. 8. 3 酸性硅胶(质量分数为 30%) :称取 70 g 活性硅胶(4. 8. 1)于烧瓶中 ,用滴管逐滴加入 30 g 浓硫酸(4. 5)并不断摇动使其较均匀混合 ,再将烧瓶加塞后固定于摇床上进行振荡 ,直至硅胶呈均匀流动状态 ,密封保存于干燥器中 ,1个月内使用 。

　　4. 8. 4 碱性硅胶 :称取 100 g 活性硅胶(4. 8. 1)于烧瓶中 ,称取 1. 2 g 氢氧化钠(4. 6)于烧杯中 ,并加入30 mL水 ,混匀后用滴管逐滴加入到硅胶中 ,再将烧瓶加塞后振荡至硅胶呈均匀流动状态 ,密封保存于干燥器中 ,1个月内使用 。

　　4. 9 碱性氧化铝 :使用前在 600 ℃下活化 24h。 于干燥器中密封保存 ,1个月内使用 。

　　4. 10 弗罗里土 :60 目 ~ 100 目 ,使用前在 140 ℃下烘烤至少 7 h,取出后 1 h 内使用 。

　　4. 11 活性炭(质量分数为 18%) :

　　活性炭 :Carbopack C,Supelco 102581) ,或其他等同类型 。

　　分散剂 :Celite545 coarse,Fluka 221401) ,或其他等同类型 。

　　称取 9. 0 g Carbopack C 和 41. 0 gCelite545 coarse充分混和 ,在 130℃下活化至少 6 h,于干燥器中密封保存 ,1个月内使用 。

　　4. 12 无水硫酸钠 :在 660 ℃下灼烧至少 6 h,于干燥器中密封保存 ,1个月内使用 。

　　5 仪器与设备

　　实验室常用仪器设备及以下设备 :

　　5. 1 高分辨气相色谱/高分辨质谱仪(HRGC/HRMS) 。

　　1) 给出这一信息是为了方便本标准的使用者 ,并不表示对该产品的认可 。如果其他等效产品具有相同的效果 ,则可使用这些等效产品 。

　　2

　　GB/T 28643—2012

　　5. 2 旋转蒸发器 。

　　5. 3 氮气浓缩器 。

　　5. 4 超声波清洗器 。

　　5. 5 振荡器(摇床) 。

　　5. 6 加速溶剂提取仪 ,压力 :10. 3 MPa(1 500 psi) ~ 13. 7 MPa(2 000 psi) ,温度 :100 ℃ ~ 200 ℃ 。

　　5. 7 天平 :感量 0. 01 g; 0. 1 mg。

　　5. 8 烘箱 :能够在 105 ℃ ~ 250 ℃范围内保持恒温( ±5 ℃) 。

　　5. 9 马弗炉 :能够在 200 ℃ ~ 700 ℃范围内保持恒温( ±10 ℃) 。

　　5. 10 玻 璃 层 析 柱 : 带 聚 四 氟 乙 烯 柱 塞 , 底 部 装 有 砂 芯 , 150 mm × 8 mm (内 径) , 300 mm × 15 mm (内径) 。

　　5. 11 自 动 凝 胶 渗 透 色 谱 (GPC) : 净 化 柱 (内 径 15 mm ~ 20 mm) , 内 装 70 g S-X3凝 胶 (200 目 ~ 400 目) 。

　　6 采样和试样制备

　　按 GB/T 14699. 1进行样品采集 ;按 GB/T 20195制备试样 ,过 0. 28 mm 孔筛 。

　　7 分析步骤

　　7. 1 提取

　　7. 1. 1 饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料和饲料添加剂(提供铜源的饲料添加剂及其预混合饲料除外)的提取

　　样品的提取采用加速溶剂提取法 。称取样品 10. 0 g(准确至 0. 01g) ,与 10g无水硫酸钠(4. 12)混合均匀 ,转移至加速溶剂提取仪(5. 6) 的不锈钢萃取池中 ,分别加入 PCDD/Fs和 DL-PCBs的13C 标记定量内标(4. 7. 1 和 4. 7. 5) ,进行提取 。

　　提取条件 :

　　b(a))) 压力(提取)溶:10(剂)3:M(正)P(己)(1(00(1)) p∶si二);氯甲烷(4. 2)= 1 ∶ 1(体积比) ,100 mL;

　　c) 温度 :120 ℃ ;

　　d) 加热时间 :7 min;静态提取时间 :8 min;吹扫时间 :2 min;

　　e) 循环 3 次 ;

　　f) 样品收集于 250 mL接收瓶中 。

　　也可采用其他等效的提取方法 。

　　7. 1. 2 提供铜源的饲料添加剂及其预混合饲料的提取

　　样品提取采用索氏提取法 。称取样品 20. 0 g(准确至 0. 01 g) , 与 10 g 无水硫酸钠(4. 12) 混合均匀 ,转移至垫有 1 cm 活性硅胶(4. 8. 1)的索氏提取筒中 ,分别加入 PCDD/Fs和 DL-PCBs的13C标记定量内标(4. 7. 1 和 4. 7. 5) ,置于索氏提取器中进行提取 。

　　提取条件 :

　　b(a))) 提取时间(提取溶剂) ::18h(正己)2(4(4). h(1);) ∶ 二氯甲烷(4. 2)= 1 ∶ 1(体积比) ,250 mL;

　　c) 回流速度 :3 次/h~4 次/h。

　　3

　　GB/T 28643—2012

　　7. 1. 3 饲料用油脂的提取

　　按 GB/T 5009. 205—2007中 5. 2. 6进行样品的提取 。

　　7. 2 净化及浓缩

　　7. 2. 1 饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料的净化

　　7. 2. 1. 1 酸性硅胶净化

　　在样品提取液中缓缓加入酸性硅胶(4. 8. 2) ,并不断摇晃 ,然后静置 ,直至提取液上清液颜色澄清 。酸性硅胶(4. 8. 2)加入量不超过 40 g。用无水硫酸钠(4. 12)玻璃柱进行过滤 ,并用 10 mL正己烷(4. 1)对玻璃瓶进行洗涤 ,将洗涤液一并加入到无水硫酸钠玻璃柱中 ;重复 3 次 ,最后将过滤液用旋转蒸发器(5. 2)浓缩至 3 mL~ 5 mL,供下一步净化用 。

　　7. 2. 1. 2 自动凝胶渗透色谱净化

　　与 7. 2. 1. 1方法可替换使用 。

　　自动凝胶渗透色谱(GPC,5. 11) 流动相采用二氯甲烷(4. 2) , 流速 5 mL/min。 收集 目标组分后浓缩至 3 mL~ 5 mL,供下一步净化用 。

　　注 : 凝胶柱放置时 ,溶剂不得流空 。

　　7. 2. 1. 3 复合硅胶柱净化

　　色谱柱填充 :取内径为 15 mm 的玻璃层析柱(5. 10) ,依次装入 1 g 活性硅胶(4. 8. 1) 、4 g碱性硅胶(4. 8. 4) 、1 g 活 性 硅 胶 (4. 8. 1) 、8 g 酸 性 硅 胶 (4. 8. 3) 、2 g 活 性 硅 胶 (4. 8. 1) 和 2 cm 无 水 硫 酸 钠(4. 12) 。干法装柱 ,轻敲色谱柱 ,使其填充均匀 。

　　用 80 mL正己烷(4. 1)预淋洗色谱柱 。 当液面降至无水硫酸钠层上方约 2 mm 时 ,关闭柱阀 ,弃去淋洗液 ,柱下放置心形瓶准备接收 。检查色谱柱 ,如果出现沟流现象应重新装柱 。

　　将浓缩液(7. 2. 1. 1 或 7. 2. 1. 2)加入柱中 ,打开柱阀 。用约 3 mL正己烷(4. 1)对烧瓶清洗 3 次 ,清洗液一并加入柱中 。

　　用 100 mL正己烷(4. 1)对色谱柱进行洗脱 ,洗脱液全收集 。

　　将收集的洗脱液用旋转蒸发器(5. 2)浓缩至 3 mL~ 5 mL,供下一步净化用 。

　　7. 2. 1. 4 碱性氧化铝柱净化

　　色谱柱填充 :取内径为 15 mm 的玻璃层析柱(5. 10) ,依次装入 6 g碱性氧化铝(4. 9) 、2 cm 无水硫酸钠(4. 12) 。干法装柱 ,轻敲色谱柱 ,使吸附剂填充均匀 。

　　用 40 mL正己烷(4. 1)预淋洗色谱柱 , 当液面降至无水硫酸钠层上方约 2 mm 时 ,关闭柱阀 ,弃去淋洗液 ,柱下放置心形瓶 。检查色谱柱 ,如果出现沟流现象应重新装柱 。

　　将浓缩液(7. 2. 1. 3)加入柱中 ,打开柱阀 ,对烧瓶清洗 3 次 ,方法同 7. 2. 1. 3。

　　7. 2. 1. 3。

　　用 40 mL正己烷(4. 1) ∶ 二氯甲烷(4. 2)= 1 ∶ 1(体积比) 进行洗脱 ,洗脱液全收集并浓缩 ,方法同

　　7. 2. 1. 5 活性炭柱净化

　　色谱柱填充 :取内径为 15 mm 的玻璃层析柱(5. 10) ,依次装入 1. 5 g 活性炭(4. 11) 、2 cm 无水硫酸钠(4. 12) 。干法装柱 ,轻敲色谱柱 ,使吸附剂填充均匀 。

　　用 10 mL 甲苯(4. 3)预淋洗色谱柱 ,再用 10 mL正己烷(4. 1)预淋洗 , 当液面降至无水硫酸钠层上

　　4

　　GB/T 28643—2012

　　方约 2 mm 时 ,关闭柱阀 。

　　将浓缩液(7. 2. 1. 4)加入柱中 ,打开柱阀 ,对烧瓶清洗 3 次 ,方法同 7. 2. 1. 3。

　　依次用 50mL正己烷(4. 1)和 80mL 甲苯(4. 3)分别洗脱 DL-PCBs和 PCDD/Fs组分 ,分别接收到两个心形瓶中 。

　　7. 2. 1. 6 弗罗里土柱净化

　　与 7. 2. 1. 5方法可替换使用 。

　　取内径为 8 mm 的玻璃层析柱(5. 10) ,依次装入 1. 0 g弗罗里土(4. 10) 、2 cm 无水硫酸钠(4. 12) 。干法装柱 ,轻敲色谱柱 ,使吸附剂填充均匀 。

　　用 50 mL二氯甲烷(4. 2) 预 淋 洗 色 谱 柱 , 淋 洗 液 流 干 后 , 取 下 聚 四 氟 乙 烯 柱 塞 , 将 柱 子 放 入 烘 箱(5. 8)中 ,于 140 ℃烘烤至少 7 h。取出后 1 h 内使用 。

　　注 :如不使用则放在 140 ℃下保存 。

　　用 50 mL正己烷(4. 1)预淋洗 , 当液面降至无水硫酸钠层上方约 2 mm 时 ,关闭柱阀 。

　　将浓缩液(7. 2. 1. 4)加入柱中 ,打开柱阀 ,对烧瓶清洗 3 次 ,方法同 7. 2. 1. 3。

　　DL-PCBs(依次)和(用)P(30)CDD(mL)/F(二)s组(氯甲)分(烷),.别(2)∶收到两个(正己烷)(心(4). 形(1)) 中(1)∶。19(体积比)和 40 mL 二氯甲烷(4. 2)分别洗脱

　　7. 2. 1. 7 微量浓缩及溶剂置换

　　洗脱液(7. 2. 1. 5 或 7. 2. 1. 6)分别用旋转蒸发器(5. 2)浓缩至 2 mL~ 3 mL,转移到 K-D 浓缩器中并在氮吹仪(5. 3)上浓缩至 0. 2 mL~0. 3 mL,最后转移至带有衬管的进样小瓶中 ,在氮气流下吹至近干 ,加入 20 μL壬 烷 溶 液(4. 4) , 再 分 别 加 入 PCDD/Fs和 DL-PCBs 回 收 率 内 标 标 准 溶 液(4. 7. 2 和4. 7. 6) ,准备进 HRGC/HRMS(5. 1)分析检测 。

　　7. 2. 2 饲料添加剂的净化

　　7. 2. 2. 1 复合硅胶柱净化同 7. 2. 1. 3。

　　7. 2. 2. 2 碱性氧化铝柱净化同 7. 2. 1. 4。

　　7. 2. 2. 3 微量浓缩及溶剂置换同 7. 2. 1. 7。

　　7. 2. 3 饲料用油脂的净化

　　按 GB/T 5009. 205—2007中的 5. 3进行样品的净化 。

　　8 仪器分析

　　8. 1 PCDD/Fs分析条件

　　8. 1. 1 HRGC 的色谱条件

　　a) 色谱柱 :DB-5MS柱(含 5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷) ,60 m×0. 25 mm(内径) × 0. 25 μm

　　(液膜厚度) ,或其他等效色谱柱 。2,3,7,8-TCDF有检出时需要换用 DB-225进行确认 。

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　　b) 进样口温度 :270 ℃ 。

　　c) 进样方式 :无分流模式 。

　　d) 传输线温度 :270 ℃ 。

　　e) 柱温 :初始温度为 150 ℃保持 3 min, 以 20 ℃/min 的速度升到 230 ℃ ,保持 18 min, 然后以

　　5 ℃/min 的速度升到 235 ℃并保持 10 min, 以 4 ℃/min升到 330 ℃并保持 3 min。

　　f) 载气 :高纯氦气(>99. 999%) ,流速 :1. 0 mL/min。

　　8. 1. 2 HRMS的质谱条件

　　a) 电离模式 : 电子轰击(EI+ ) 。

　　b) 电子能量 :35 eV。

　　c) 分辨率 :≥10 000。

　　d) 源温 :270 ℃ 。

　　e) 扫描模式 : 电压选择离子模式(VSIR) 。

　　f) 质谱采集质量碎片类型 :见表 D. 1。

　　8. 2 DL-PCBs分析条件

　　8. 2. 1 HRGC 的色谱条件

　　a) 色谱柱 : 同 8. 1. 1。

　　b) 进样口温度 :290 ℃ 。

　　c) 进样方式 :无分流模式 。

　　d) 传输线温度 :270 ℃ 。

　　e) 柱 温 : 初 始 温 度 为 80 ℃保 持 3 min, 以 15 ℃/min 的 速 度 升 到 150 ℃保 持 2 min, 然 后 以

　　2. 5 ℃/min 的速度升到 270 ℃并保持 3 min, 以 15 ℃/min升到 330 ℃并保持 13 min。

　　f) 载气 :高纯氦气(>99. 999%) ,流速 :1. 0 mL/min。

　　g) 质谱采集质量碎片类型 :见表 D. 2。

　　8. 2. 2 HRMS的质谱条件

　　同 8. 1. 2。

　　8. 3 定性、定量测定

　　8. 3. 1 定性定量的原则

　　在给定色谱/质谱条件下获取样品分析的色谱/质谱峰 , 以保留时间和精确质量测定的两个质量碎片离子的理论丰度比进行定性 , 以平均响应因子法进行定量计算 。PCDD/Fs和 DL-PCBs的分析质量色谱图参 见 图 E. 1~ 图 E. 9。 配 合 饲 料 中 PCDD/Fs和 DL-PCBs的 分 析 质 量 色 谱 图 参 见 图 F. 1~图 F. 5。

　　各目标化合物的相对保留时间应符合表 D. 3 和表 D. 4 的规定 。

　　监测的两个质量数离子的峰面积比值应符合表 D. 5 的要求 ,或在校正标准 CS3中相应两个质量数离子的峰面积比值的 ±10%范围内 。

　　由校正溶液(CS系列 ,见表 C. 4 和表 C. 8)的分析结果 ,绘制天然化合物与标记化合物之间的校正曲线 。 由 5个校正标准溶液测定各化合物的 RRF或响应因子(RF) ,并计算其平均 值 , 获 得 平 均 响 应因子 。

　　由于使用13C-1,2,3,7,8,9-HxCDD作为回收率内标 , 因此 1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD 的定量不能采用

　　6

　　GB/T 28643—2012

　　严格的同位素稀释法 ,而采用 1,2,3,4,7,8-HxCDD 和 1,2,3,6,7,8-HxCDD 的13C标记定量内标平均响应进行定量计算 。

　　8. 3. 2 相对响应因子

　　相对响应因子是天然的 PCDD/Fs和 DL-PCBs与同位素标记的 PCDD/Fs和 DL-PCBs的仪器响应之比 。适用于除 1,2,3,7,8,9-HxCDD和 OCDF外的其他 PCDD/Fs和所有 DL-PCBs与对应标记定量内标之间 。

　　根据表 D. 1 和表 D. 2 中第一和第二个精确质量数离子的响应峰面积 ,按式(1) 计算各化合物相对于其标记化合物的 RRF。

　　RRF …………………………( 1 )

　　式中 :

　　RRF — 除 1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD 和 OCDF外 的 其 他 PCDD/Fs和 DL-PCBs的 相 对 响 应

　　因子 ;

　　A1n和 A2n—PCDD/Fs和 DL-PCBs的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　c1 — 校正标准中标记定量内标化合物的浓度 ,单位为纳克每毫升(ng/mL) ;

　　A1l和 A2l — 标记定量内标化合物的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　cn — 校正标准中目标化合物的浓度 ,单位为纳克每毫升(ng/mL) 。

　　8. 3. 3 响应因子

　　8. 3. 3. 1 响应因子适用范围

　　响应因子是 PCDD/Fs及 DL-PCBs与其对应内标(非同位素内标) 的仪器响应之比 。适用于 1, 2, 3,7,8,9-HxCDD 和 OCDF与其对应定量内标之间 , 以及所有 PCDD/Fs和 DL-PCBs的定量内标与其回收率内标之间 。

　　8. 3. 3. 2 1,2,3,7,8,9-HxCDD 与其定量内标之间的响应因子

　　根据表 D. 1 中第一和第二个 精 确 质 量 数 离 子 的 响 应 峰 面 积 , 按 式(2) 计 算 1, 2, 3, 7, 8, 9-HxCDD的 RFh。

　　RFh

　　式中 :

　　RFh — 1,2,3,7,8,9-HxCDD 的响应因子 ;

　　A1h和 A2h — 1,2,3,7,8,9-HxCDD 的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　chl-1 和 chl-2 — 13C-1,2,3,4,7,8-HxCDD和13C-1,2,3, 6, 7,8-HxCDD 的浓度 ,单位为纳克每

　　毫升(ng/mL) ;

　　A1hl-1 和 A2hl-1 — 13C-1,2,3,4,7,8-HxCDD 的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　A1hl-2 和 A2hl-2 — 13C-1,2,3,6,7,8-HxCDD 的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　ch — 校正标准中 1,2,3,7,8,9-HxCDD 的浓度 ,单位为纳克每毫升(ng/mL) 。

　　8. 3. 3. 3 OCDF与其对应定量内标之间 , 以及所有 PCDD/Fs和 DL-PCBs的定量内标与其回收率内标之间的响应因子

　　根据表 D. 1 和表 D. 2 中第一和第二个精确质量数离子的响应峰面积 ,按式(3) 计算各化合物相对于其内标化合物的 RF。

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　　GB/T 28643—2012

　　RF …………………………( 3 )

　　式中 :

　　RF —PCDD/Fs和 DL-PCBs的定量内标以及 OCDF的相对因子 ;

　　A1s和 A2s — OCDF及所有 PCDD/Fs和 DL-PCBs定量内标的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　cis — 对应内标化合物的浓度 ,单位为纳克每毫升(ng/mL) ;

　　A1is和 A2is — 对应内标化合物的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　cs — OCDF 及 所 有 PCDD/Fs 和 DL-PCBs 定 量 内 标 的 浓 度 , 单 位 为 纳 克 每 毫 升

　　(ng/mL) 。

　　9 结果计算与报告

　　9. 1 样品定量

　　9. 1. 1 同位素稀释定量

　　适用于除 1,2,3,7,8,9-HxCDD和 OCDF外的其他 PCDD/Fs和所有 DL-PCBs的定量 。

　　在样品提取前 ,定量添加13C标记的定量内标 ,对 PCDD/Fs和 DL-PCBs进行计算 。根据测定的相对响应和样品取样量与13C标记定量内标加入量 ,按式(4)计算样品中 目标化合物的浓度 :

　　cex

　　式中 :

　　cex — 样品中 PCDD/Fs和 DL-PCBs的浓度 ,单位为皮克每克(pg/g) ;

　　A1n和 A2n—PCDD/Fs和 DL-PCBs的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　m1 — 样品提取前加入的13C标记定量内标量 ,单位为皮克(pg) ;

　　A1l和 A2l — 13C标记定量内标的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　RRF — 除 1,2,3, 7, 8, 9-HxCDD 和 OCDF外 的 其 他 PCDD/Fs和 DL-PCBs的 相 对 响 应因子 ;

　　m2 — 试样量 ,单位为克(g) 。

　　9. 1. 2 内标定量

　　9. 1. 2. 1 1,2,3,7,8,9-HxCDD 的定量

　　样品中 1,2,3,7,8,9-HxCDD 以 1,2,3,4,7,8-HxCDD和 1,2,3,6,7,8-HxCDD 的13C标记内标为定量内标 ,按式(5)计算 :

　　cex

　　式中 :

　　cex — 样品中 1,2,3,7,8,9-HxCDD 的浓度 ,单位为皮克每克(pg/g) ;

　　A1h和 A2h — 1,2,3,7,8,9-HxCDD 的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　mhl-1 和 mhl-2 — 样品提取前加入13C-1, 2, 3,4, 7, 8-HxCDD 和13C-1, 2, 3, 6, 7, 8-HxCDD 的量 ,

　　单位为皮克(pg) ;

　　A1hl-1 和 A2hl-1 — 13C-1,2,3,4,7,8-HxCDD 的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　A1hl-2 和 A2hl-2 — 13C-1,2,3,6,7,8-HxCDD 的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　8

　　GB/T 28643—2012

　　RFh — 1,2,3,7,8,9-HxCDD 的响应因子 ;

　　m3 — 试样量 ,单位为克(g) 。

　　9. 1. 2. 2 OCDF的定量

　　样品中 OCDF以 OCDD 的同位素标记内标为定量内标 ,按式(6)计算 :

　　cex

　　式中 :

　　cex — 样品中 OCDF的浓度 ,单位为皮克每克(pg/g) ;

　　A1s和 A2s — OCDF的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　mis — 13C-OCDD 的量 ,单位为皮克(pg) ;

　　A1is和 A2is — 13C-OCDD 的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　RF — OCDF的响应因子 ;

　　m4 — 试样量 ,单位为克(g) 。

　　9. 1. 3 回收率计算

　　样品提取液中13C标记定量内标的量采用测定的响应因子 ,按式(7)计算 :

　　ms …………………………( 7 )

　　式中 :

　　ms — 测定结果 ,单位为皮克(pg) ;

　　A1s和 A2s — 13C标记定量内标的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　mis — 13C标记回收率内标的量 ,单位为皮克(pg) ;

　　A1is和 A2is — 13C标记回收率内标的第一个和第二个质量数离子的峰面积 ;

　　RF —PCDD/Fs和 DL-PCBs定量内标的响应因子 。

　　由上述定量结果 ,按式(8)计算13C标记定量内标的回收率 :

　　X …………………………( 8 )

　　式中 :

　　X — 回收率 , % ;

　　ms — 测定结果 ,单位为皮克(pg) ;

　　m5 — 加入量 ,单位为皮克(pg) 。

　　9. 2 毒性当量的计算

　　按照世界卫生组织(WHO)规定的 PCDD/Fs和 DL-PCBs的 TEF(见表 A. 1) 和式(9) 计算样品中的 PCDD/Fs和 DL-PCBs的 TEQ。

　　TEQi = TEFi × ci …………………………( 9 )

　　式中 :

　　TEQi— 样品中 PCDD/Fs或 DL-PCBs的毒性当量浓度 ,单位为皮克毒性当量每克(pgTEQ/g) ; TEFi —PCDD/Fs或 DL-PCBs的毒性当量因子 ;

　　ci — 样品中 PCDD/Fs或 DL-PCBs的浓度 ,单位为皮克每克(pg/g) 。

　　9. 3 结果报告

　　9. 3. 1 样品中的 PCDD/Fs和 DL-PCBs结果需要报告测定的 17种 PCDD/Fs和 12种 DL-PCBs的浓

　　9

　　GB/T 28643—2012

　　度 、检测限和各自的 TEQ值 , 以及 TEQPCDDs、TEQPCDFs、TEQPCDD/Fs和 TEQPCDD/Fs+DL- PCBs。

　　9. 3. 2 报告检测限按 GB/T 8170中数据修约规则修约为 1 位或 2 位有效数字 。浓度和 TEQ结果大于 100时 ,按 GB/T 8170中数据修约规则只保留整数部分 ;结果介于 1 和 100之间时 ,结果保留三位有效数字 ;结果低于 1 时 ,按 GB/T 8170中数据修约规则修约为 1位或 2位有效数字 。浓度和 TEQ结果的小数位数应不多于检测限位数 。

　　9. 3. 3 以样品原始重量报告结果 。

　　9. 3. 4 在检测限及其以上的结果以实际结果报告 ;低于检测限的结果可以报告 “未检出 ”或注明小于检测限 。

　　10 检测方法的精密度和回收率

　　10. 1 精密度

　　本标准方法的批内变异系数 CV≤10% ,实验室间分析结果的相对偏差 RD<20% 。

　　10. 2 回收率

　　本标准方法对于 PCDD/Fs和 DL-PCBs标记内标的回收率分别在 40% ~ 144%和 50% ~ 141% 。

　　11 质量保证/质量控制(QA/QC)

　　11. 1 PCDD/Fs和 DL-PCBs分析中均使用有资质的厂家提供的标准品 。

　　11. 2 分析所用有机试剂浓缩 10 000倍不得检出 PCDD/Fs及 DL-PCBs。

　　11. 3 方法线性试验 : 在测试的 5 个标准溶液的浓度范围内 ,如果各化合物的 RRF(或 RF) 结果稳定(RRF变异系数<20% ,RF变异系数 <35%) ,则可以采用 RRF和 RF 的均值进行计算 ; 否则 ,需要重新进行标准曲线的制作和校正 。

　　11. 4 实际样品均应添加内标进行定量分析 。

　　10

　　GB/T 28643—2012

　　附 录 A

　　(规范性附录)

　　17种 PCDD/Fs和 12种 DL-PCBs及其对应的毒性当量因子列表

　　表 A. 1 PCDD/Fs及其毒性当量因子

　　化合物

　　WHO-TEF(1998)

　　CAS编号

　　PCDD/Fs

　　2,3,7,8-TCDD

　　1. 0

　　1746-01-6

　　2,3,7,8-TCDF

　　0. 1

　　51207-31-9

　　1,2,3,7,8-PeCDD

　　1. 0

　　40321-76-4

　　1,2,3,7,8-PeCDF

　　0. 05

　　57117-41-6

　　2,3,4,7,8-PeCDF

　　0. 5

　　57117-31-4

　　1,2,3,4,7,8-HxCDD

　　0. 1

　　39227-28-6

　　1,2,3,6,7,8-HxCDD

　　0. 1

　　57653-85-7

　　1,2,3,7,8,9-HxCDD

　　0. 1

　　19408-74-3

　　1,2,3,4,7,8-HxCDF

　　0. 1

　　70648-26-9

　　1,2,3,6,7,8-HxCDF

　　0. 1

　　57117-44-9

　　1,2,3,7,8,9-HxCDF

　　0. 1

　　72918-21-9

　　2,3,4,6,7,8-HxCDF

　　0. 1

　　60851-34-5

　　1,2,3,4,6,7,8-HpCDD

　　0. 01

　　35822-46-9

　　1,2,3,4,6,7,8-HpCDF

　　0. 01

　　67562-39-4

　　1,2,3,4,7,8,9-HpCDF

　　0. 01

　　55673-89-7

　　OCDD

　　0. 000 1

　　3268-87-9

　　OCDF

　　0. 000 1

　　39001-02-0

　　同位素标记的 PCDD/Fs

　　13C-2,3,7,8-TCDD

　　—

　　76523-40-5

　　13C-2,3,7,8-TCDF

　　—

　　89059-46-1

　　13C-1,2,3,7,8-PeCDD

　　—

　　109719-79-1

　　13C-1,2,3,7,8-PeCDF

　　—

　　109719-77-9

　　13C-2,3,4,7,8-PeCDF

　　—

　　116843-02-8

　　13C-1,2,3,4,7,8-HxCDD

　　—

　　109719-80-4

　　13C-1,2,3,6,7,8-HxCDD

　　—

　　109719-81-5

　　13C-1,2,3,7,8,9-HxCDD

　　—

　　109719-82-6